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目的:
研究宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌各期组织中凋亡抑制蛋白Livin、Survivin的表达及HPV16、18亚型的感染情况,探讨它们在宫颈癌及癌前病变中的意义及相关性。
方法:
1.采用免疫组织化学SP法检测70例宫颈鳞癌、11例宫颈腺癌、74例CIN各级组织、20例正常宫颈组织(包括良性宫颈病变)中Livin的表达情况,应用原位杂交法检测Survivin mRNA及HPV16、18亚型在上述各组组织中的表达情况。分析Livin蛋白、Survivin mRNA、HPV16/18DNA的阳性表达与CIN、宫颈癌患者的临床分期、病理类型、组织分化、肿瘤生长类型以及肿瘤淋巴结转移等有无关系,分析Livin、Survivin表达与HPV16、18亚型感染的相关性。
2.统计学处理:所有统计处理均用SPSS for windows13.0统计软件进行。率的比较采用x2检验(四格表或列联表)或x2分割法,Fisher精确概率法,两者相关性采用Spearman等级相关分析,P<0.05认为统计学有差异,P<0.01认为统计学有显著性差异。
结果:
1.Livin蛋白在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌组织中的阳性表达率分别为0.00%(0/20)、31.08%(23/74)及67.90%(55/81),三组间有显著性差异(P<0.001),且两两比较均有差异(P<0.0125)。
2.Livin蛋白在CINⅠ~Ⅱ级、CINⅢ级中的阳性表达率分别为20.51%(8/39)、42.86%(15/35),CINⅢ级组Livin的阳性表达率高于CINⅠ~Ⅱ级组,差异有统计学意义(P=0.038)。
3.Livin蛋白在宫颈癌中~高分化组和低分化组中的阳性表达率分别为55.81%(24/43)、81.58%(31/38),低分化组Livin的阳性表达率高于中~高分化组,差异有统计学意义(P=0.013)。
4.Livin蛋白在宫颈癌Ⅰ~Ⅱa期、Ⅱb~Ⅲ期的阳性表达率分别为61.02%(36/59)、86.36%(19/22),Ⅱb~Ⅲ期的阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱa期,差异有统计学意义(P=0.030)。
5.Livin蛋白在宫颈鳞癌和宫颈腺癌组织的阳性表达率分别为68.57%(48/70)、63.64%(7/11),两组比较无差异(P=1.000)。
6.Livin蛋白在宫颈癌肿块外生型、内生型、溃疡型、颈管型中阳性表达率分别为69.23%(27/39)、66.67%(10/15)、68.75%(11/16)、63.64%(7/11),四种肿块生长类型间的阳性表达率比较无差异(P=0.987)。
7.Livin蛋白在宫颈癌有淋巴结转移者的阳性表达率71.43%(15/21)高于无淋巴结转移者42.42%(14/33),差异有统计学意义(P=0.037)。
8.Survivin mRNA在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌组织中的阳性表达率分别为0.00%(0/20)、44.59%(33/74)及77.78%(63/81),三组间有显著性差异(P<0.001),且两两比较均有差异(P<0.0125)。
9.Survivin mRNA在CINⅢ级组的阳性表达率为57.14%(20/35),高于CINⅠ~Ⅱ级组33.33%(13/39),差异有统计学意义(P=0.04)。
10.Survivin mRNA在宫颈癌低分化组的阳性表达率为92.11%(35/38),高于中~高分化组65.12%(28/43),两组比较有显著性差异(P=0.004)。
11.Survivin mRNA在宫颈癌Ⅱ b~Ⅲ期的阳性表达率为95.45%(21/22),高于Ⅰ~Ⅱa期71.19%(42/59),差异有统计学意义(P=0.042)。
12. Survivin mRNA在宫颈鳞癌和宫颈腺癌组织的阳性表达率分别为75.71%(53/70)、90.91%(10/11),两组比较无差异(P=0.461)。
13. Survivin mRNA在宫颈癌外生型、内生型、溃疡型、颈管型中阳性表达率分别为80.05%(32/39)、73.33%(11/15)、75.00%(12/16)、72.73%(8/11)。四组之间无差异(P=0.844)。
14. Survivin mRNA在宫颈癌有淋巴结转移者的阳性表达率90.48%(19/21)高于无淋巴结转移者45.45%(15/33),两组比较有显著性差异(P=0.001)。
15.HPV16/18 DNA在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌组织中的阳性表达率分别为5.00%(1/20)、50.00%(37/74)及85.19%(69/81)。三组间有显著性差异(P<0.001),且两两比较均有差异(P<0.0125)。
16. HPV16/18 DNA在CINⅠ~Ⅱ级组、CINⅢ级组中的阳性表达率分别为41.03%(16/39)、60.00%(21/35),差异无统计学意义(P=0.103)。
17.HPV16/18 DNA在宫颈癌中~高分化组和低分化组中的阳性表达率分别为86.05%(37/43)、84.21%(32/38),差异无统计学意义(P=0.816)。
18. HPV16/18 DNA在宫颈癌Ⅰ~Ⅱa期、Ⅱb~Ⅲ期的阳性表达率分别为84.75%(50/59)、86.36%(19/22),差异无统计学意义(P=1.000)。
19.HPV16/18 DNA在宫颈鳞癌和宫颈腺癌组织的阳性表达率分别为85.71%(60/70)、81.82%(9/11),差异无统计学意义(P=1.000)。
20.HPV16/18 DNA在宫颈癌外生型、内生型、溃疡型、颈管型中阳性表达率分别为82.05%(32/39)、86.67%(13/15)、87.50%(14/16)、90.91%(10/11)。四组之间无差异(P=0.871)。
21.HPV16/18 DNA在宫颈癌有或无淋巴结转移者的阳性表达率分别为80.95%(17/21)、87.88%(29/33),差异无统计学意义(P=0.697)。
22.81例宫颈癌中,Livin蛋白与Survivin mRNA表达共阳性47例,共阴性10例,两者在宫颈癌中的表达呈正相关(相关系数rs=0.269,P=0.015)。
23.81例宫颈癌中,Livin蛋白与HPV16/18DNA表达共阳性49例,共阴性6例,两者在宫颈癌中的表达无相关性(相关系数rs=0.160,P=0.154)。
24.81例宫颈癌中,Survivin mRNA与HPV16/18 DNA表达共阳性57例,共阴性6例,两者在宫颈癌中的表达呈正相关(相关系数rs=0.279,P=0.012)。
结论:
1.Livin蛋白、Survivin mRNA在正常宫颈组织中不表达,在CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率逐渐升高,提示它们的过表达可能在宫颈癌的发生、发展中起一定作用。
2.Livin蛋白与Survivin mRNA的表达相似,在CINⅢ级的阳性表达率高于CINⅠ~Ⅱ级,与宫颈癌的组织分化、临床分期、淋巴结转移有关,而与宫颈癌的病理类型、肿块生长类型无关:肿瘤分化越差,期别越晚或出现淋巴结转移等,它们的表达越高,提示与肿瘤的恶性程度及不良预后有关。
3.Livin蛋白与Survivin mRNA在宫颈癌组织中的表达呈正相关,可能有协同促进作用;本研究尚无确切证据表明与患者的生存时间以及肿瘤复发是否有相关性,还在临床随访中。
4.HPV16、18亚型在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中感染率逐渐升高,但与CIN级别、临床分期、组织分化、病理类型、肿块类型、淋巴结转移无关;本研究中发现Survivin mRNA的表达与HPV16/18正相关,可能通过调节细胞凋亡过程参与HPV介导的宫颈癌变过程。
5.凋亡抑制蛋白Livin与HPV16、18亚型不存在相关性,其机制还未阐明,有待进一步验证。