耳聋也叫听力障碍，是指人们感受声音大小和辨别声音能力下降的一种表现。根据世界卫生组织(WHO)的调查数据显示，听力残疾在五种身体残疾中比例较高，严重影响人们的正常生活。据介绍，我国是听力残疾的高发国家，根据2006年第二次全国残疾人口抽样调查显示，我国听力残疾人口约2004万，占总残疾人口的24.16％。其中，7岁以下聋儿80余万，且每年约新生3万耳聋患儿。国外调查资料显示，新生儿听力障碍的发生率约为1％至3％，而我国由于地域等不同因素的影响，据不完全统计约为2％至6％高于国外的报道。耳聋是由遗传和环境因素引起的，其中50％的耳聋患者是由遗传因素造成的。由遗传因素引起的耳聋包括综合征型耳聋(syndromic hearing impairment SHI，占30％)和非综合征型耳聋(nonsyndromic hearing impairment NSHI，占70％)。非综合征型耳聋可以根据不同的遗传方式进一步分为：常染色体隐性遗传、常染色体显性遗传、X-连锁遗传和母系遗传。世界各国学者对本国耳聋患者进行大规模的调查研究发现，其中以常染色体隐性遗传最为常见，占75％～80％，且症状严重。据估计约有100多种基因与NSHI有关，每年都有导致NSHI的基因被克隆，其中编码连接蛋白26(Cx26)的GJB2基因位于人染色体13q11-q12上，编码区为681bp。GJB2基因突变在导致语前性遗传性非综合征性耳聋方面有着重要的意义，研究发现：50％的白种人常染色体隐性遗传性NSHI与GJB2基因突变有关，即使是散发病例该基因突变也达10％～37％。目前常染色体隐性遗传性NSHI中，GJB2基因的突变方式有100多种，约占遗传性耳聋的20％，因此对GJB2基因的突变进行筛查及研究，对耳聋的诊断、治疗、预后，尤其是预防有着重要的意义，其次为控制耳聋的发生及流行病学研究提供依据和手段，对改善人类健康素质做出贡献。目前，已有研究人员在全国范围内进行研究调查，但这些研究主要着重与GJB2基因突变的频率及235delC突变的检测率的研究，尚未对宁波、温州两地区GJB2基因突变进行完整的研究且国内外尚未GJB2基因致病突变复合杂合形式致聋的报道。所以本研究针对宁波、温州两地区非综合征型耳聋患者，收集大量的非综合征型耳聋患者的资料，进行GJB2基因的分子流行病学研究及GJB2基因复合杂合致病突变与非综合症型耳聋相关性研究，研究工作包括以下三个方面： 第一部分非综合征型耳聋患者临床资料的收集和GJB2基因235delC突变的筛查 目前发现的非综合征型常染色体隐性遗传性耳聋相关基因已有40余个，而其中约50％的NSHI患者是GJB2基因突变导致。本研究共收集宁波、温州两地区聋哑学校、聋儿康复中心及温州医学院附属第二医院耳鼻喉科，余姚人民医院的NSHI患者标本共510份，在标本收集的同时进行详细的临床资料收集。研究发现GJB2基因235delC突变为宁波、温州两地人群的突变热点，突变率达到16.47％。此研究对NSHI患者进行大规模的突变筛查及遗传咨询有着重要的意义。 第二部分非综合征型耳聋患者GJB2基因突变频谱绘制 1994年，第一个与耳聋的有关的常染色体隐性遗传(DNFB)的基因被定位于13q11。研究发现100多种基因与耳聋有关，近来一些基因已经得到克隆鉴定。近几年来，随着分子生物学和分子遗传学的迅猛发展、人类基因组计划的实施和完成及生物信息学这一新兴学科的出现，遗传性耳聋的分子病因学研究取得了飞速的发展。目前已报道GJB2基因突变包括错义突变、无义突变、移码突变、插入及缺失等突变类型共一百多种。 本研究对宁波、温州两地区NSHI患者510份标本进行GJB2基因的全序列检测，发现GJB2基因序列改变达到76.27％；其中致病突变率为19.80％，最常见的235delC突变达到16.47％。本研究中共发现GJB2序列改变14种，其中4种为GJB2基因新位点变异方式，对其基因型与耳聋表型之间的关系进行分析。明确了宁波、温州两地区GJB2基因突变发生频率，绘制了宁波、温州两地区NSHI人群GJB2基因的突变图谱，并建立快速分子诊断方法，为聋病的分子诊断提供可靠的方法和依据，为宁波、温州两地区的聋病产前诊断、遗传筛查和遗传咨询提供实验证据，为在宁波、温州两地区范围内开展耳聋疾病的基因诊断提供流行病学数据。 第三部分携带GJB2基因致病突变的八个中国汉族耳聋家系的遗传特点分析 NSHI患者中约50％是由于GJB2基因突变引起的。在这里我们报道八个携带GJB2基因致病突变的中国汉族家系，先证者的临床表现都为双侧，重度至极重度耳聋，及听力曲线呈现多样性。GJB2基因突变分析时发现：先证者分别携带有235delC+/+、176del166bp+/-/235delC+/-、176del16bp+/-/299delAT+/-、235delC+/-/299delAT+/-、及235delC+/-/512insAACG+/-致病突变，而其父母却仅有一个相应位点的杂合突变。我们对这八个家系进行分析，确定其基因型与表型之间的关系，分析其遗传特征。为携带有致病突变的家庭提供产前筛查和产前诊断的理论依据，避免家庭再次生育相同基因型的儿童和耳聋的再次发生。