论文部分内容阅读
背景:肺癌是全世界人类癌症相关死亡的主要原因之一,占所有癌症相关死亡的25%,其发病率及死亡率居于全球恶性肿瘤首位,严重威胁人类的生命和健康。omega-3多不饱和脂肪酸(omega-3PUFAs)是人体内一种必需脂肪酸,与我们的生命以及身体健康有十分紧密的关系.Omega-3PUFAs可以对人体心血管系统、免疫系统、神经系统功能进行一定的调控作用。近年来,omega-3PUFAs的抗肿瘤作用一直是一个研究的热点。有越来越多的证据表明,在癌症的发生和发展中omega-3PUFAs发挥着十分重要的作用。目前对于omega-3PUFAs的抗肿瘤研究主要是集中在胃癌、乳腺癌及前列腺癌等上,而关于omega-3PUFAs是否有抑制肺癌作用的研究相对较少。目的:本研究主要是为探索omega-3PUFAs是否能诱导人肺腺癌细胞株H1975及H460的凋亡及其机制是否与omega-3PUFAs改变survivin在肺腺癌细胞中的表达有关。方法:本研究都以未处理细胞组做为阴性对照组,吉西他滨处理细胞组做为阳性对照组,Omega-3PUFAs处理组为治疗组。本研究使用omega-3PUFAs[二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA)以及二十二碳六烯酸(docosahex-oenoic acid,DHA)]处理人肺腺癌细胞株H460及H1975。使用不同剂量(25、50、100、150、200、300μmol/L)的EPA和DHA处理人肺腺癌细胞H1975及H460 24、48、72小时后,采用CCK-8法检测H460及H1975细胞活性;使用不同剂量(100、200、300μmol/L)的EPA和DHA处理人肺腺癌细胞H1975及H460 24小时后,利用流式细胞仪检测EPA和DHA对人肺腺癌细胞H1975及H460细胞凋亡的影响;使用200μmol/L的EPA和(100、200μmol/L)DHA处理人肺腺癌细胞H1975及H460 24小时后,利用流式细胞仪检测EPA和DHA对人肺腺癌细胞H1975及H460细胞周期的影响,使用不同剂量(100、200、300、400μmol/L)EPA和DHA处理人肺腺癌细胞株H460及H1975 24小时后,利用蛋白印迹法(Western-blot)检测survivin蛋白在H460及H1975的表达;通过采用Western-blot验证过表达survivin的效果,采用CCK-8法检测过表达survivin后人肺腺癌细胞H1975及H460的细胞活性。结果:omega-3PUFAs可抑制人肺腺癌细胞株H1975及H460的细胞活性,并且其肿瘤细胞活性与omega-3PUFAs的剂量呈负相关。经Annexin V-FITC/PI双染后采用流式细胞仪测定肿瘤细胞凋亡,omega-3PUFAs处理组与未处理组比较有差异,且有统计学意义(P<0.05);100、200μmol/L omega-3PUFAs对人肺腺癌细胞株H460及H1975的凋亡无明显影响,300μmol/L omega-3PUFAs可诱导人肺腺癌细胞株H460及H1975细胞凋亡,且有统计学意义(P<0.05)。经PI单染后采用流式细胞仪测定肿瘤细胞周期,omega-3PUFAs对人肺腺癌细胞株H1975及H460的细胞周期无明显影响。通过采用western-blot法检测到H460及H1975细胞中有survivin表达,且survivin表达量随omega-3PUFAs作用剂量不同而变化,survivin在阴性对照组中呈高表达,与阴性对照组相比,给予高浓度omega-3PUFAs处理组的survivin表达量明显降低。survivin表达量降低的H1975及H460细胞,过表达survivin后,其肿瘤细胞活性较阴性对照组明显增加。结论:omega-3PUFAs(EPA和DHA)可抑制人肺腺癌细胞株H1975及H460的细胞活性及诱导肿瘤细胞凋亡,其机制很有可能与omega-3PUFAs改变survivin在人肺腺癌细胞株H1975及H460中的表达有关。