目的：本实验分别利用OPN慢病毒及蛋白处理骨髓间充质干细胞，检测内源性及外源性OPN表达差异导致的骨髓间充质干细胞增殖及迁移功能的变化，从而比较OPN对骨髓间充质干细胞功能的影响。方法：1.分别分离培养新生OPN基因敲除型及野生型C57BL/6小鼠(鼠龄一天)的骨髓间充质干细胞。培养后行流式、PCR、WB鉴定；2.提取野生型成年小鼠OPN基因后构建OPN质粒并通过氯化钙-氯喹法进行慢病毒包装；3.慢病毒感染细胞，并行定量PCR及WB检测各细胞内OPN表达量的变化。4.分别利用外源性OPN蛋白及OPN慢病毒处理细胞后用CCK8法检测细胞的增殖能力改变。5.同样分组利用Transwell小室检测骨髓间充质干细胞迁移能力变化。结果：1.镜下见骨髓内分离的细胞生长状态良好，呈漩涡状排列。流式细胞仪检测示细胞纯度高，PCR、WB鉴定结果显示OPN基因敲除型小鼠无OPN基因及蛋白的表达，而野生型小鼠可正常表达；2.从成年小鼠肾脏提取的OPN基因长度约为900bp。将此基因片段插入慢病毒载体后，经氯化钙-氯喹方法进行质粒包装后获得滴度为2.5×108TU/ml的含OPN基因片段的慢病毒及空载体慢病毒；3.慢病毒分别感染基因敲除型及野生型小鼠的骨髓间充质干细胞后荧光镜下可细胞均有荧光产生，经定量PCR及WB检测OPN呈梯度表达；4.CCK8检测结果提示无论是外源性OPN蛋白作用还是内源性OPN基因作用，均能提高骨髓间充质干细胞的增殖能力；5.Transwell小室迁移实验显示外源性及内源性OPN表达的增高均能导致骨髓间充质干细胞迁移能力的增强。结论：内源性及外源性骨桥蛋白均能够促进骨髓间充质干细胞的增殖及迁移功能。