小反刍兽疫(Peste des Petits Ruminants,PPR)是由小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)引起的一种急性、高度传染性、致命性疾病,主要感染偶蹄小反刍动物。该病主要表现为发热,口腔炎,肺炎,结膜炎,眼鼻粘膜脓性分泌物,严重腹泻,高发病率和死亡率。PPRV属于副黏病毒科麻疹病毒属,其基因组编码6个结构蛋白和2个非结构蛋白。虽然PPRV各蛋白的结构、功能等分子生物学的相关研究已经取得进展,但其分子致病机制和免疫机制仍然缺乏相关信息。而病原与宿主的互作是研究其分子致病机制的途径,目前PPRV该方面的研究比较少。本论文以病毒与宿主蛋白的互作为切入点,研究核仁素在小反刍兽疫病毒复制过程中的作用及其机制。PPRV N蛋白高度保守且免疫原性最高,在病毒复制和细胞趋向性中发挥重要作用。另外,PPRV N蛋白与许多宿主调节因子相互作用。因此,本研究旨在通过免疫共沉淀实验及质谱分析筛选与PPRV N蛋白互作的宿主蛋白。我们成功的筛选到了宿主分子核仁素(NCL),随后通过Co-IP、GST-pull down实验进一步证实了NCL与N蛋白的直接相互作用。激光共聚焦实验结果显示NCL与PPRV N蛋白共定位于细胞核内。通过构建PPRV N蛋白及NCL的截短真核表达质粒并分别进行Co-IP实验,我们成功鉴定了N蛋白与NCL互作的功能域。实验结果证明核仁素的CTD域介导其与N蛋白的相互作用,而N蛋白的NTD域介导其与NCL的相互作用。其次,我们利用慢病毒包装系统成功构建了NCL过表达细胞系,为研究NCL在PPRV生长过程中的作用奠定了基础。当在Vero-SLAM细胞过表达NCL时,PPRV N蛋白的表达量降低、病毒基因组拷贝数减少且病毒滴度降低;而通过siRNA下调内源性NCL后,PPRV N蛋白的表达量增加、PPRV的基因组拷贝数增加且病毒滴度上升。由此可见,NCL在PPRV复制过程中发挥负调控作用。并且,我们通过双荧光素酶实验初步发现NCL促进IFN-β的产生。综上所述,本研究首次发现NCL与PPRV N蛋白相互作用,并且NCL是PPRV复制过程中的一个负调控因子。我们的研究结果表明NCL可能通过调控PPRV的复制而影响PPRV的发病机制,这将有助于我们了解PPRV的感染机制。