斜带石斑鱼P450芳香化酶基因克隆及其表达调节的研究

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通过构建雌雄同体雌性先熟的斜带石斑鱼脑和性腺cDNA文库,克隆得到了斜带石斑鱼芳香化酶基因P450aromB(脑型)和P450aromA(卵巢型)cDNA全长;应用一步法RT-PCR结合southern杂交的方法,研究了这两种芳香化酶在2龄斜带石斑鱼组织中的表达情况和在胚胎发育过程中的表达情况;通过投喂外源雄性激素甲基睾酮(MT)和芳香化酶抑制剂来曲唑(AI)诱导了2龄斜带石斑鱼发生性别转变,研究了性转变过程中血清中性类固醇激素T和E2的变化情况,通过半定量RT-PCR方法研究了下丘脑、脑垂体和性腺中P450芳香化酶mRNA的表达情况,并结合离体孵育的方法检测了性腺中芳香化酶活性的变化;用sbGnRH、HCG、E2和MT等不同激素对下丘脑、脑垂体和性腺进行离体孵育刺激,检测了刺激后芳香化酶的表达情况;并研究了不同温度和E2刺激对胚胎发育过程中P450芳香化酶表达的影响.
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