耐辐射球菌DR-2566基因缺失突变株的构建及其基因功能的初步分析

来源 :南华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bigger111
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  为了研究DR_2566基因在耐辐射球菌极端抗性机制中的作用,本课题通过生物信息学方法分析、预测其生物学功能并利用同源重组的方法,将目的基因进行基因敲除,获得DR_2566缺失突变株。检测DR_2566在紫外辐射、过氧化氢、丝裂霉素C等极端抗性中发挥的作用,对DR_2566基因功能初步进行研究。  方法:  1.对DR_2566基因及其对应编码蛋白DR_2566的高级结构、理化性质、生物学功能等,使用生物信息学方法分析、预测。2.运用同源重组的方法构建DR_2566基因缺失突变株。  3.紫外辐照、过氧化氢及丝裂霉素C(Mitomycin,MMC)处理后,对野生型DR菌株、DR_2566基因缺失突变型DR菌株的生存率等进行分析,初步研究DR_2566基因在DR菌极端抗性中的功能。  结果:  1.生物信息学分析结果显示,基于整体核苷酸序列的搜索,没有发现其他生物的基因组中存在DR_2566的同源基因,这说明DR_2566为DR菌基因组中特有的基因。结构域分析结果提示, DR_2566为限制性内切酶家族(restriction_endonuclease_like superfamily)的一个成员,具有极短补丁修复(Very short patch repair,VSR)核酸内切酶Vsr功能(复制,重组和修复)。  2.成功获得了DR_2566基因上游片段、下游片段以及Kan抗性基因(含有GroEL基因启动子)的三个片段。将获得的三个片段通过T4连接酶连接三片段后的回收产物转化DR感受态,经卡那霉素Kan筛选,成功构建了DR_2566基因缺失突变株。  3.制作 DR_2566基因缺失突变株、野生株在紫外辐照、过氧化氢、丝裂霉素C处理下的存活率曲线,从中可以看出,DR_2566基因缺失突变株的存活率均明显低于其野生型菌株的存活率,其差异有统计学意义(P<0.05)。  结论:  DR_2566基因的缺失导致突变株对紫外辐射、过氧化氢、丝裂霉素C的敏感性增强,DNA修复能力有所减弱,提示DR_2566基因在DR菌极端抗性中发挥了一定功能。
其他文献
3D打印技术发展至今,已经历半个多世纪,从“快速成型”到“3D打印”再到“增材制造”,从默默无闻到家喻户晓.近十年得到了大家高度重视和飞速发展,3D打印企业、新型打印技术
期刊
受到我国语言环境的影响,高中英语语法学习具有一定的难度,诸多学生的学习效果都不太理想,有效解决高中生对于语法学习的困扰显得至关重要.鉴于此,本文通过分析目前高中英语
托幼机构卫生保健工作是儿童保健的重要组成部分,托幼机构卫生保健工作又是多部门密切配合的社会工程.该研究描述中国托幼机构卫生保健工作的实施与管理现状,掌握《托儿所、
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
齐大山选厂反浮选工艺改造是鞍矿公司近年的重点技术改造项目 ,称为齐大山选厂的“希望工程” ,已顺利进入生产调试和试生产阶段 ,效果良好。该项目属于边生产、边施工的在线
卡洛斯·绍拉之所以能在欧洲电影史中占有举足轻重的地位,并在世界电影史中享有较高的声誉,是因为他的电影在具有极高艺术性的同时,还蕴含着重要的现实意义和时代价值.绍拉电
研究目的:  探讨全血中元素钙、镁、锌、铜、铁、硒与浙江省成人代谢综合征(Metabolicsyndrome,MS)的关系,为代谢综合征的预防和治理提供实验室参考依据。  研究对象与方法
目前对日本血吸虫病的家庭聚集性的研究,国内主要集中于对病例在家庭中的分布问题上.进行日本血吸虫感染病例分布的家庭聚集性分析,仅仅表明了该地区血吸虫病有家庭聚集性现
随着国家教育体系深化改革,在全面推进素质教育的进程中,明确了以“健康第一”为指导思想的体育教学理念.教育部在课程改革文件中,将体育课更名为体育健康课,表明体育教育与
高中学生普遍感到物理难懂难学,思想负担较重。怎样才能有效地减轻学生负担呢?我在教学过程做了四点尝试,取得了良好的效果。