羊干酪性淋巴结炎（Caseous lymphadenitis,CLA）又被称为羊皮下脓肿,羊只罹患CLA时眼观及触诊可见体表皮下或淋巴结处出现明显的肿胀,当为内脏型时剖检可见内脏器官化脓性病变。病羊临床表现为采食下降、消瘦及被毛暗淡、脱落,产奶羊产奶量明显下降,肉羊屠宰时胴体品质降低,一旦有羊发病极易在畜群间传播。目前尚无有效的疫苗防控与治疗手段,因此患病动物的早期诊断并及时隔离成为控制该病的主要措施。最初认为CLA只由伪结核棒状杆菌引起,但近年来的研究表明,金黄色葡萄球菌和化脓隐秘杆菌也是该病重要的病原菌,并且在这三种病原菌中对化脓隐秘杆菌的关注最少,而且目前几乎没有针对该菌的血清学检测方法。本研究在陕西关中地区采集山羊脓样并分离化脓隐秘杆菌的基础上,进行药物敏感性和致病性等特性研究;使用经超声破碎的菌液上清蛋白作为包被抗原,建立了一种操作简单且方便快捷的化脓隐秘杆菌间接ELISA检测方法并进行效果评价与初步应用。研究获得以下结果:1.从272份脓汁样品中分离并纯化得到化脓隐秘杆菌24株,分离率约为8.8%;革兰氏染色呈阳性,显微镜下为球杆状或杆状,在培养基中添加血液或血清可促进其生长;在含5%绵羊血的琼脂培养基上培养24 h以上,可见白色针尖大小菌落,在菌落周围存在直径比菌落大2～3倍的β型溶血环;对分离株进行生化试验、16S r RNA基因PCR扩增及测序、特异性基因PCR鉴定结果均表明分离菌为化脓隐秘杆菌无误;菌株毒力基因plo、cbp A、nan P、nan H、fim A基因的携带率为100%,fim C、fim E基因的携带率为83.3%;微量肉汤稀释法检测药物对分离株的最小抑菌浓度（MIC）,结果显示该菌对青霉素、头孢噻呋钠等多种抗生素敏感,对磺胺类药物耐药;分离株接种小鼠与山羊,注射部位均能形成脓肿,采集脓样能再次分离到化脓隐秘杆菌。2.建立了针对化脓隐秘杆菌的间接ELISA检测方法。结果显示抗原的最佳包被浓度为33.2 ng/m L,血清最佳稀释度为1:200,最佳封闭液为10%的牛血清白蛋白（BSA）,酶标二抗的最佳稀释度为1:10 000;测得阳性临界值为OD450=0.366;将阳性血清稀释为1:1 280时测得OD450的值仍为阳性;该方法检测实验室保存的羊链球菌阳性血清、羊口疮阳性血清、羊痘阳性血清、羊伪结核阳性血清、羊金黄色葡萄球菌阳性血清、羊小反刍兽疫阳性血清,结果均为阴性;该方法批内变异系数在7.5%以内,批间变异系数在9.1%以内,重复性较好。3.对200份山羊血清样品检测结果显示,其中47份患脓包山羊血清阳性数为5,占比为10.6%;153份体表无明显症状山羊血清阳性数为24,占比为15.7%;整体血清阳性数为29,占比为14.5%。本研究对从山羊脓样中分离到的化脓隐秘杆菌进行了鉴定及部分生物学特性研究,在此基础上建立了一种操作简单且方便快捷的检测化脓隐秘杆菌的间接ELISA方法,该方法特异性强、敏感性高,可重复性良好,可用于临床血清样品检测,为后续针对该病源的检测、预防与净化提供了参考依据。