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目的:砷是一种致癌物质,具有免疫毒性,可以改变血液中T细胞比例、干扰呼吸道免疫、改变与免疫途径相关的miRNA模式和减少淋巴结树突状细胞（Dendritic cell,DC）数量。DC是专职抗原提呈细胞,在免疫应答过程中发挥重要作用。多项研究表明无机砷能够减弱DC的分化成熟、迁移能力、抗原提呈、细胞因子分泌、以及活化初始T细胞等DC免疫功能。miR-155在多种免疫细胞中均有表达,DC中的miR-155-5p主要通过转录后调控靶基因来参与调控DC的分化发育、迁移、抗原提呈以及T细胞活化等生理和病理学过程。无机砷被报道能够影响机体miR-155的表达水平和减少树突状细胞数量。但是在无机砷暴露的骨髓来源树突状细胞（BMDCs,Bone marrow-derived dendritic cells）中miR-155的表达水平及其可能作用,目前尚缺乏实验证据。本研究首先检测无机砷暴露BMDCs中miR-155-5p及其靶基因TAB2和SOCS1的表达水平;然后分别构建miR-155-5p沉默（miR-155-5p sponge）和TAB2过表达（Ad-TAB2）细胞模型,观察无机砷暴露BMDCs共刺激分子、黏附趋化分子和细胞因子等的m RNA表达水平。本研究将为探索无机砷的免疫毒性和致癌性等提供可能的新线索。研究方法:1.BMDC的体外诱导培养取C57BL/6雌性小鼠,颈椎脱臼法处死,取出胫骨和股骨;1ml注射器打通髓腔,PBS反复冲洗2-3次,收集于EP管中;红细胞裂解液裂解,离心后弃上清;用完全培养基悬浮细胞,进行铺板;第二天进行换液,隔天半量换液,第七天收集六孔板中悬浮细胞,即为小鼠骨髓来源的未成熟的树突状细胞。2.腺病毒载体的构建miR-155-5p sponge腺病毒和Ad-TAB2腺病毒由汉恒生物科技（上海）有限公司提供。采用TCID50滴度检测腺病毒滴度,结果为:HBAD-EGFP NC对照=2.51×1010 PFU/mlHBAD-Adeasy-mmu-miR-155-5p-sponge-EGFP=3.16×1010 PFU/m LHBAD-EGFP过表达对照=2.51×1010 PFU/mlAdeasy14-m-Tab2-3×flag-EGFP=1.58×1010 PFU/m L3.miR-155-5p sponge抑制表达系统和TAB2过表达系统构建培养BMDC第七天后,接种到6孔板中,分别加入相应的病毒量,37℃培养8 h,更换培养液,培养72小时后,正倒置一体显微镜下观察感染效率。4.Western blot实验提取蛋白后采用BCA试剂盒进行蛋白定量。依次进行配下胶、配制上胶、蛋白上样、电泳、转膜、封闭阻断、敷一抗、敷二抗、ECL显色反应等过程进行western blot实验。5.Real-time PCR实验提取总RNA后测定RNA浓度,采用Ta Ka Ra试剂盒进行miRNA的反转录和常规基因反转录,再利用两步法PCR扩增标准程序进行反应。6.数据处理结果以X±SD表示,应用软件SPSS26.0进行数据分析。使用单因素方差分析（ANOVA）和LSD-t检验进行统计学差异分析,P＜0.05表示具有统计学意义。结果:1.无机砷暴露的BMDCs中miR-155-5p及其靶基因的表达水平。与Con组相比,As诱导miR-155-5p表达（P＜0.05）,抑制miR-146a-5p和miR-199-5p表达（P＜0.05）,但不改变miR-155-3p的表达;与Unt组相比,As诱导miR-155-5p表达（P＜0.05）,抑制miR-146a-5p和miR-199-5p表达（P＜0.05）,对miR-155-3p无明显影响;BMDCs经LPS诱导成熟后,miR-155-5p、miR-146a-5p和miR-199-5p、miR-155-3p表达均显著增加（P＜0.05）。同时利用预测了miR-155-5p的31个靶基因,预测了miR-155-5p与靶基因TAB2和SOCS1的结合位点。无机砷暴露抑制TAB2和SOCS1的蛋白和m RNA水平（P＜0.05）。2.构建和验证miR-155-5p沉默细胞模型。选取MOI=300构建miR-155-5p沉默细胞模型,与miR-155-5p NC组相比,miR-155-5p sponge处理使miR-155-5p的靶基因Tab2的转录水平和蛋白水平均呈现增加趋势（P＜0.05）,表明miR-155-5p sponge模型构建成功。3.miR-155-5p沉默对无机砷暴露BMDCs功能的可能调控作用。与As组中NC组相比,miR-155-5p sponge组中BMDCs的细胞形态无明显改变,表面分子Cd80、黏附分子Icam1、前炎性因子Tnf-α、Th1诱导型细胞因子Il-12b的转录水平下降（P＜0.05）。4.TAB2过表达对无机砷暴露BMDCs功能的可能调控作用。与Ad-NC组相比,Ad-TAB2组中BMDCs的TAB2蛋白表达水平升高（P＜0.05）,TAB2过表达模型构建成功。与As组中Ad-NC组相比,Ad-TAB2组中DC的Cd83、Cd70和Il-23a的m RNA有下降趋势（P＜0.05）,Ccr5和Il-1β基因表达增加（P＜0.05）。结论:1、无机砷诱导树突状细胞miR-155-5p和抑制其靶基因TAB2和SOCS1表达。2、miR-155-5p沉默可促进靶基因TAB2和SOCS1表达。3、miR-155-5p沉默和TAB2过表达能够抑制砷暴露树突状细胞共刺激分子、黏附趋化分子和细胞因子的m RNA表达。