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目的:设计一种逐级响应性的PEG修饰的甘露聚糖纳米载体,携载抗癌药物阿霉素(Doxorubicin,DOX),实现其靶向递送并清除M2型肿瘤相关巨噬细胞(Tumor associated macrophages,TAMs)的目的,以期抑制乳腺癌的生长和侵袭转移,改善乳腺癌不良预后。方法:由于肿瘤内M2型TAMs具有高表达甘露糖受体的特性,基于此设计利用甘露聚糖(Mannan)靶向M2型TAMs的纳米载体,通过低氧响应性基团偶氮苯(Azo)与甲氧基聚乙二醇胺(Methoxypolyethylene glycol amine,MW=2000,PEG2000)相连,用以逃避机体正常组织巨噬细胞吞噬,如肝库否细胞。再进一步将甘露聚糖经苯硼酸频哪醇酯(phenylboronic acid pinacol ester hydrochloride,B)修饰,用以形成疏水性内核包载药物DOX,从而得到具有低氧和ROS逐级响应性的纳米载体PEG2000-Azo-Mannan-B(PAMB)。通过核磁共振、红外光谱分析载体结构;对其粒径,电位等理化性质进行表征。利用共聚焦显微镜考察低氧、常氧环境下,细胞分别对不同纳米制剂的摄取能力,采用MTT法考察在低氧、常氧条件下,纳米制剂对M2型TAMs的杀伤作用。建立荷4T1肿瘤动物模型,考察纳米制剂的体内靶向性、研究M2型TAMs清除和抑制肿瘤侵袭转移效果,并对肿瘤内相关因子进行考察。结果:成功制备低氧与ROS逐级响应性PAMB,包载DOX(PAMB/DOX),纳米载体粒径均小于200 nm,呈类球型,形态稳定均一;PAMB具备低氧响应性断裂的能力,PAMB/DOX具备ROS响应性释放DOX的特性。共聚焦显微镜考察细胞摄取结果显示,与常氧条件下相比,低氧条件下,细胞对PAMB/DOX有更高的摄取效率。细胞毒性实验结果表明,与常氧组相比,在低氧条件下,PAMB具有更强的细胞毒性。体内分布实验结果表明,PAMB/ICG呈现了较好的肿瘤靶向性,与未经PEG修饰的甘露聚糖纳米载体相比,PAMB/ICG肝脏分布较少,表明经PEG保护的甘露聚糖纳米载体PAMB有效的减少了肝脏的捕获;体内效果结果表明,与游离DOX相比,PAMB/DOX达到了更好地清除M2型TAMs的效果,较好的抗肿瘤作用,并且PAMB/DOX组显示出明显的抑制肿瘤肺转移效果;进一步研究肿瘤微环境酶的变化,结果表明PAMB/DOX减少了基质金属蛋白酶MMP-9的表达,减少了 E-钙粘蛋白的表达缺失,同时抑制了肿瘤血管的生成。结论:PAMB/DOX通过杀伤M2型TAMs,有效地抑制了 4T1肿瘤的肺转移。潜在的机制研究发现,PAMB/DOX明显抑制了 MMP-9表达,血管新生等。表明清除M2型TAMs,能够改善肿瘤微环境,减少肿瘤转移带来的危害。