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由Ustilaginoideavirens(Cooke)Takahashi侵染引起的稻曲病,目前已成为水稻的重大病害之一。然而至今对稻曲病菌繁殖体的生物学了解非常有限。本文对稻曲病菌薄壁分生孢子的生物学进行一些深入的研究,包括产孢、存活、及萌发生物学三大内容。
一产孢生物学研究
在移植菌量为1菌丝琼脂圆块(0.5cm)条件下,孢子产生量的快速增长期为培养1d到5d。一些植物组织煮出汁可促进该病菌产孢,以马铃薯煮出汁最佳,在组织汁中添加蔗糖可显著提高产孢量。病菌产孢最适合温度区间为26~28℃。静止培养不产孢,振荡培养导致大量产孢。培养期间的光照条件对产孢量没有明显的影响。
制备培养的菌丝初始移植量越多产孢量越多,将菌丝碎化处理可提高产孢量。移植菌丝的老幼程度可影响产孢量,幼龄菌丝更容易产孢。菌株间的产孢能力差异极明显,有的菌株产孢量很大,而有的菌株却不产孢。对于不产孢的菌株,采用黑光灯照、或改变产孢用培养基等处理,仍未发现其可以产孢。菌株经连续多次转代培养后,其产孢能力明显下降,甚至变成不产孢。
二存活生物学研究
在相对湿度(RH)为100%条件下8d,孢子萌发率仅稍微下降;但在RH为50%条件下仅5小时,就导致孢子萌发率急剧下降。孢子的萌发活力与生存介质与温度有关,在25℃水中放置4周,孢子萌发率仍保持在90%,放置14周后还有接近16%~30%的孢子可萌发;而在-20~C水中放置,1周后孢子萌发率已下降至20%以下。在25℃的10%甘油中放置,4周后孢子萌发率已下降至5%以下。孢子的存放浓度可影响萌发活力,浓度低于1×106个孢子/毫升的,放置4周后孢子萌发率仍维持在80%以上,浓度为1×108个孢子/毫升的,放置1周后孢子萌发率已下降至10%以下。孢子存放期间的光照条件对萌发率的影响较小
三萌发生物学研究。
薄壁分生孢子在琼脂平板表面上比在其它介质(载玻片,凹玻片,硅胶)表面上的萌发率高。萌发适宜温度为20℃~30℃,适宜pH值为6~7。不同氨基酸对孢子萌发的影响有明显差异,有的氨基酸抑制萌发,而有的氨基酸却促进萌发,其中谷氨酸可强烈促进孢子萌发。部分维生素对孢子的萌发有显著的促进作用。天然植物组织煮汁培养基可促进孢子萌发,以马铃薯煮汁的效果最佳。相关试验常用的试剂如吐温、中性红、链霉素和氯霉素,对孢子萌发没有显著的影响。采用振荡培养法获取孢子,随着培养时间的延长,所得孢子的萌发活力下降。