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目的:探索调节性T细胞(Regulatory T cells,Tregs)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS)保护效应及其相关机制。方法:6-8周的雄性BALB/c小鼠分成五组:(1)假手术组(sham组);(2)LPS 1 天组(L1);(3)LPS 2 天组(L2);(4)LPS 4 天组(L4);(5)LPS 7 天组(L7)。麻醉后用20G无管芯的静脉套管针经口插入小鼠气管中,假手术组小鼠经气管导管滴入生理盐水(1.5ml/kg),ARDS组小鼠经气管导管滴入LPS(3mg/kg),分别在造模后1天,2天,4天,7天取材。取右肺和脾脏,制备肺组织和脾单细胞悬液,流式细胞术分析不同时间点肺和脾单细胞悬液中Treg细胞的比例和数量。为了进一步探讨Treg细胞对ARDS的作用。我们采用anti-CD25抗体腹腔注射建立Treg耗竭小鼠模型,再将BALB/c小鼠重新分组,分为2天组和4天组两个大组,每个大组又重新分为4个小组,分别是(1)Saline+IgG;(2)Saline+anti-CD25;(3)LPS+IgG;(4)LPS+anti-CD25;2天或4天后取材。充分暴露胸腔,丝线结扎小鼠右肺肺门,生理盐水灌洗左肺,获取并收集左肺支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)。记录各组小鼠 BALF 中总细胞数,流式细胞术分析肺组织单细胞悬液中性粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞比例。右肺中叶切片HE染色,显微镜下观察肺组织切片炎症情况,并行肺病理学评分。取右肺和脾脏做单细胞悬液,流式细胞术测定IFN-γ+Th1细胞,IL-17A+Th17细胞,IL-4+Th2细胞比例。ELISA法检测BALF中TGF-β 1释放,流式免疫磁珠法分析BALF中Th亚群相关的各种炎症因子IFN-γ,IL-17a,IL-4,IL-6,TNF-α,IL-10等浓度。qPCR 测定肺组织中 IFN-y,IL-17a,IL-4,IL-6,TNF-α,IL-10 等基因表达。结果:ARDS小鼠肺和脾脏中发现Treg细胞聚集。腹腔注射anti-CD25抗体拮抗小鼠体内Treg细胞成熟,达到耗竭Treg细胞效应,再模拟小鼠ARDS模型。与ARDS组相比,尽管并未影响淋巴细胞比例,Treg细胞耗竭的ARDS小鼠中BALF总细胞计数降低,中性粒细胞比例降低,巨噬细胞比例升高。此外,Treg细胞耗竭的ARDS小鼠下调CD326+上皮细胞数目,破坏CD31+内皮细胞增殖能力,下调Th1和Th17免疫反应。结论:Treg细胞有助于ARDS肺部炎症消退,促进肺上皮损伤修复,并能通过调节Th1和Th17免疫反应发挥对ARDS的保护作用。