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目的:探讨重楼/七叶一枝花(Paris polyphylla)的醇提物单体pp-10诱导人胃癌细胞BGC-823和SGC-7901细胞凋亡和自噬及其分子机制方法:采用MTT法观察不同浓度的重楼单体pp-10对人胃癌细胞BGC-823、SGC-7901、MGC-803,人肺癌细胞A549,人结肠癌细胞SW620,人舌鳞癌细胞Tca8113和人正常肝细胞LO2的增殖抑制作用;克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体pp-10对人胃癌细胞BGC-823、SGC-7901的克隆形成的影响;Transwell法检测药物对胃癌细胞的迁移作用的影响;Hoechst 33342染色法检测pp-10作用于人胃癌BGC-823、SGC7901细胞后细胞核形态的改变;Annexin V-FITC/PI双染法检测BGC-823和SGC7901细胞凋亡;Western blotting法检测重楼单体pp-10对胃癌细胞BGC-823和SGC-7901凋亡和自噬相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、Bax、Bcl-2、LC3、P62以及PI3K/AKT信号通路相关蛋白(Akt、p-Akt(Ser473)、m TOR、p-m TOR(Ser2448)、P70s6k、p-P70s6k(Thr389))表达的影响;免疫荧光检测细胞自噬情况。结果:1.重楼单体pp-10能显著抑制BGC-823细胞的生长,作用呈时间-效应关系及剂量-效应关系;能显著抑制人胃癌细胞SGC-7901、MGC-803,人肺癌A549细胞,人结肠癌细胞SW620,人舌鳞癌Tca8113细胞呈剂量-效应关系,但对正常肝细胞LO2几乎没影响。2.克隆形成抑制实验表明随着pp-10浓度的增加,BGC-823和SGC7901细胞克隆形成逐渐减少,与对照组相比有显著差异。3.pp-10抑制胃癌BGC-823和SGC-7901细胞的迁移。Transwell实验结果显示,随着药物浓度的增加,能穿过Transwell小室的BGC823和SGC7901细胞减少,说明药物能抑制胃癌细胞的迁移。4.Hoechst 33342染色观察药物作用于胃癌细胞之后的细胞形态变化。在荧光显微镜下观察可见细胞核固缩、边聚、裂解、出现凋亡小体等细胞凋亡形态学变化。5.流式细胞术检测细胞凋亡实验显示,与对照组相比,加药组细胞出现了凋亡,且随着药物浓度的增加,胃癌BGC-823和SGC-7901凋亡率逐渐升高。6.Western blotting结果显示,随着药物浓度的增加,线粒体相关凋亡信号通路蛋白Caspase-9、Caspase-3及PARP均出现切割条带,细胞促凋亡蛋白Bax的表达水平增加,抗凋亡蛋白Bcl-2减少,自噬相关蛋白Ⅱ型LC3增加,P62蛋白表达减少,p-Akt(Ser473)蛋白的表达水平下降,Akt的下游蛋白p-m TOR(Ser2448)、p-P70s6k(Thr389)表达减少。7.激光共聚焦结果显示,pp-10作用于胃癌BGC-823和SGC-7901细胞24h后,细胞内LC3出现了点状聚集,表明细胞发生了自噬。结论:1.重楼活性单体pp-10能抑制胃癌BGC-823和SGC-7901细胞的增殖、克隆形成和迁移;能抑制肺癌A549细胞、结肠癌细胞SW620、舌鳞癌细胞Tca8113的增殖,且对正常肝细胞无影响。2.重楼活性单体pp-10能通过线粒体途径引起胃癌BGC-823和SGC7901细胞发生凋亡。3.重楼活性单体pp-10能抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路,引起细胞自噬