与传统的二维单层细胞培养相比，三维多细胞球(MCSs)能够更好地模拟体内真实组织的结构和生理功能。因此他们在药物筛选和肿瘤研究等生物医药领域有很重要的应用。然而，在制备多细胞球的过程中会面临很多困难，从而严重限制了其应用。理想的制备方法应该能够获得尺寸分布很窄的多细胞球，同时可以调控多细胞球的尺寸大小。此外，制备方法应该简单，经济并且可扩展放大。　　为了实现以上的目的，在本课题中我们开发了一种新的细胞培养多孔板，培养板的底部附着了一层细胞不粘附的PHEMA水凝胶薄膜。当浸泡在水中时，水凝胶膜将会发生溶胀并产生褶皱。通过优化交联剂浓度和水凝胶膜的厚度等制备条件，我们得到溶胀诱导的具有圆形或者正六边形褶皱图案的水凝胶膜表面。NIH3T3细胞实验表明，当细胞悬液加入到溶胀诱导的起皱图案化水凝胶膜表面后，细胞将依靠重力作用向底部沉降，由于膜表面存在褶皱图案，细胞将向褶皱孔洞的中心位置聚集，并逐渐自组装形成多细胞球。利用这种方法，在连续培养48h后，我们可以获得单分散的紧致的多细胞球，同时通过调节接种到水凝胶膜表面的细胞悬液的细胞密度，可以控制多细胞球的尺寸。AO/EB染色和细胞的再铺展表征都证明用该法制备的多细胞球仍然具有良好的活性。　　这种制备多细胞球的方法与传统的细胞单层培养的方法具有良好的兼容性。在一个孔中可以一次性制备数千个多细胞球，我们期望这种方法可以为多细胞球在生物医药领域的进一步应用提供便利的条件。