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目的:运用分子生物学实验手段,在分子水平通过观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达水平探讨中药补阳还五汤熏蒸治疗缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)的作用机理;同时,在基因水平进一步探讨MMP-9基因rs17577,rs3918242多态性与缺血性脑卒中的关联性。为今后桂西地区缺血性脑卒中的防治提供分子生物学、基因特点等重要参考依据,为今后防治缺血性脑卒中的各种手段寻找更合适的切入点。方法:从右江民族医学院附属医院神经内科、康复医学科选取41例缺血性脑卒中患者和41例健康体检人员,分别采集血清,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent method,ELISA)检测,比较缺血性脑卒中病例组与正常对照组血清中VEGF、BDNF、MMP-9表达水平。进一步对已入选的41例缺血性脑卒中患者进行中药补阳还五汤熏蒸治疗,并在治疗前后分别进行日常生活能力评分(activities of daily living,ADL)和采集血清进行ELISA检测,比较中药补阳还五汤熏蒸治疗前后患者ADL评分变化及血清VEGF、BDNF、MMP-9表达水平的变化。再另选缺血性脑卒中患者(152例)和健康体检人员(152例),采用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术进行MMP-9基因多态性研究,分析MMP-9基因rs17577,rs3918242多态性与缺血性脑卒中的关联性。结果:在分子水平,ELISA检测发现:(1)缺血性脑卒中患者血清VEGF(78.65±6.74)、BDNF(1567.66±247.17)表达水平均分别显著性低于正常对照组(161.61±47.44;2030.94±300.97),差异有统计学意义(P<0.05)。而缺血性脑卒中患者血清MMP-9表达水平(10832.63±2993.04)显著性高于正常对照组(7987.62±4080.87),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)中药补阳还五汤熏蒸治疗后,ADL评分(61.92±5.01)显著高于治疗前评分(43.26±3.27),差异有统计学意义(P<0.05)。中药补阳还五汤熏蒸治疗后,血清VEGF(114.21±30.72)、BDNF(2014.46±301.96)表达水平均分别显著性高于治疗前表达水平(79.66±7.69;1828.35±287.39),差异有统计学意义(P<0.05)。而中药补阳还五汤熏蒸治疗后血清MMP-9表达水平(9083.54±1616.99)显著性低于治疗前表达水平(10356.30±2515.68),差异有统计学意义(P<0.05)。在基因水平,基因多态检测发现:(1)MMP-9基因位点rs17577与rs3918242完全连锁;(2)缺血性脑卒中组与对照组MMP-9基因位点rs17577与rs3918242基因型频率和等位基因频率的比较:缺血性脑卒中组MMP-9 rs17577位点基因型频率,以G/G型最为多见75.0%,A/G型占24.3%,A/A型仅占0.7%;等位基因频率,G为87.2%,A为12.8%。而对照组MMP-9 rs17577位点基因型频率,G/G型占比达76.3%,A/G型占21.7%,而A/A型仅占1.9%;等位基因频率,G为87.2%,A为12.8%。缺血性脑卒中组MMP-9 rs3918242位点基因型频率,以C/C型最为多见75.0%,T/C型占24.3%,T/T型也仅占0.7%;等位基因频率,C为87.2%,T为12.8%。而对照组MMP-9 rs3918242 C/C型占76.3%,T/C占21.7%,而T/T仅占1.9%;等位基因频率,C为87.2%,T为12.8%。(3)x 2检验结果显示,缺血性脑卒中组与对照组MMP-9基因位点rs17577与rs3918242基因型频率和等位基因频率的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在分子水平,与正常对照组相比较,缺血性脑卒中患者血清MMP-9表达水平显著性升高而VEGF、BDNF表达水平显著性下降。中药补阳还五汤熏蒸治疗后,可显著性提升患者ADL评分,并显著性降低患者血清MMP-9表达水平和显著性升高VEGF、BDNF表达水平,提示中药补阳还五汤熏蒸治疗对缺血性脑卒中具有较好的治疗作用。在基因水平,桂西地区人群MMP-9基因位点rs17577与rs3918242完全连锁,但桂西地区人群MMP-9基因rs17577,rs3918242多态性与缺血性脑卒中患病无相关性。