霍乱弧菌是一种革兰阴性的水生弧菌。主要通过水和食物进行传播。感染人体后霍乱弧菌能够定殖于小肠粘膜上皮细胞,产毒型霍乱弧菌通过产生霍乱毒素导致人体产生严重腹泻、电解质平衡失调、代谢酸中毒等一系列临床症状。近年来,中国多次出现了由于聚餐食用甲鱼而导致的霍乱疫情（主要是由O139血清群霍乱引起）,在公共卫生学领域引起了人们的高度关注。然而,目前为止,对这一公共卫生学事件的研究还仅限于流行病学调查、溯源分析,还没有人进行过感染实验来对这一现象进行进一步的验证和阐释。本研究首先通过构建生物发光的霍乱弧菌并利用小动物成像的方法对O139血清群霍乱弧菌在甲鱼体表及体内的定殖情况进行了探索。在甲鱼体表,O139血清群霍乱弧菌的定殖存在位置分布的聚集性,其中,霍乱弧菌在甲鱼背面的定殖能力要强于腹面,主要定殖部位为:背面的甲壳、裙边及四肢上,腹面定殖菌量较少且主要集中在四肢上。在甲鱼体内,霍乱弧菌的定殖部位是消化道,其他器官中并没有发现霍乱弧菌的定殖。之后我们构建了 O139血清群霍乱弧菌重要定殖因子（mshA,gbpA,tcpA）的基因缺失株、回补株,根据小动物成像实验确定的定殖部位,通过竞争定殖实验定量的对一些重要粘附因子在甲鱼体表和体内的定殖作用进行了探索。结果发现:O139血清群霍乱弧菌的重要定殖因子在甲鱼的体表和体内呈现出不同的定殖作用。其中,MSHA（甘露糖敏感血凝素）是霍乱弧菌在甲鱼体表定殖的重要因子,但是TCP菌毛（毒素共调解菌毛）以及GBPA蛋白（几丁质结合蛋白）对于霍乱弧菌在甲鱼体表的定殖方面并没有发挥作用。在甲鱼体内,起重要定殖作用的因子是TCP菌毛和GBPA蛋白,mshA基因的缺失并没有引起霍乱弧菌在甲鱼肠道中定殖能力的下降,相反,缺失株的定殖能力还有轻微的上升。接着我们通过小动物活体成像的实验方法直接观察了生物发光标记的O1群霍乱弧菌菌株在甲鱼体表的定居部位及增殖。结果发现:O1血清群霍乱弧菌在甲鱼体表的定殖同样具有位置聚集性,表现出了与O139血清群霍乱弧菌相似的定殖部位。以甲鱼背部裙边和背甲定殖最强,四肢上也有一定数量霍乱弧菌的定殖。与背部相比,腹面的定殖菌量相对较少,且集中于四肢上。通过构建O1血清群霍乱弧菌主要定居因子的基因缺失株并通过竞争定殖的实验方法,我们分析了 O1群霍乱弧菌在甲鱼体表定殖的主要决定因子。发现甘露糖敏感血凝素（MSHA）也是O1群霍乱弧菌在甲鱼体表定殖的主要因子之一。之后,我们通过生长曲线的测定,选择生长能力接近的O1和O139血清群霍乱弧菌,进行不同血清群霍乱弧菌在甲鱼体表的竞争实验,比较O1和O139血清群霍乱弧菌在甲鱼体表定殖能力的差异。结果发现,在整体数据上来看,O139群霍乱弧菌比O1群菌株有更强的定殖优势,且直接分离自甲鱼的菌株定殖能力更强。最后,通过双层平皿裂解实验,我们检测了本实验室保存的五株O1血清群霍乱弧菌分型噬菌体对产毒型霍乱弧菌甲鱼分离株（包括O1及O139血清群）的裂解情况。并发现VP2噬菌体能够裂解全部的O1血清群产毒型霍乱弧菌甲鱼分离株和绝大多数的O139血清群产毒型霍乱弧菌甲鱼分离株。借助第一部分研究所建立的霍乱弧菌定殖模型,并通过向甲鱼养殖水体中添加噬菌体的方法,我们观察并检测到了定殖于甲鱼体表霍乱弧菌逐渐减少的趋势和定殖于甲鱼肠道霍乱弧菌数量明显下降的现象。此外,通过对水体中霍乱弧菌数量的检测,我们发现VP2噬菌体对甲鱼养殖水体中的霍乱弧菌也表现出了良好的清除效果。通过本部分对VP2噬菌体清除效果的初步研究我们可以得出结论:VP2噬菌体对产毒型霍乱弧菌具有良好的清除效果。可以进一步研究并发展和应用于甲鱼养殖业,已达到对甲鱼体表、体内以及养殖环境中的霍乱弧菌进行清除的目的。从而预防和减少食源性霍乱感染病例的发生。