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膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的恶性癌症之一,其发病率有逐年上升趋势,其中浅表性膀胱癌约占三分之二。由于膀胱癌具有多发性和术后高复发性的临床特点,所以导致约70%的浅表性膀胱癌术后容易复发,而且约20%-30%患者恶性程度会提高。因此,浅表性膀胱癌术后定期抗肿瘤药物膀胱灌注治疗,对肿瘤术后复发及早期预防性治疗具有很重要的临床意义。最理想的膀胱内灌注治疗药物是抗肿瘤疗效好且毒副作用小,全身吸收少、不良反应小,并且能在膀胱上皮细胞中迅速达到有效药物浓度,杀伤残留的肿瘤细胞,从而减少肿瘤的复发机会。而现在临床应用的抗肿瘤药物膀胱灌注具有较强的全身毒性和局部激惹,且有效率较低。这表明寻找新的灌注药物以降低膀胱癌术后复发是一个迫切的需要。研究表明,现在有较多的天然植物化学药表现出了抗肿瘤效果,并且具有相对无毒的优点。杨梅素(Myricetin)是一种黄酮醇类天然化合物,具有多种药理活性,如抗氧化,降血糖,血小板活化因子拮抗,消炎抑菌,护肝保肝,降低神经毒性等药用价值。抗癌是杨梅素的主要药理活性之一,其抑制肿瘤的作用已在一些实验中得到证实,其具体抗癌机制已成为近期研究热点。本研究通过体外研究,探讨杨梅素对膀胱癌细胞BIU-87的作用效果及机制,以期为表浅膀胱癌患者术后预防复发提供新的方法和思路。目的:本课题就杨梅素在体外对膀胱癌BIU-87细胞增殖的影响进行研究,并对其体外诱导凋亡及其可能机制进行探讨。方法:培养人膀胱癌细胞株BIU-87,加入不同浓度杨梅素对其进行干预,在倒置显微镜下观察细胞形态学变化;并利用MTT法确定用药浓度,选择最佳药物浓度进行后续研究;用Hoechst 33258染色法检测杨梅素对膀胱癌细胞株BIU-87凋亡的影响;并用RT-PCR检测细胞凋亡相关基因survivin及caspase-3在药物诱导作用下转录水平的改变,免疫印迹法检测survivin和caspase-3蛋白在杨梅素作用下的表达变化。结果:MTT结果显示杨梅素对BIU-87细胞的生长抑制作用呈时间剂量依赖性,40μg/ml杨梅素用药时,细胞生长抑制率约为50%;各诱导组经Hoechst 33258荧光染色后观察到细胞随药物浓度增加凋亡更明显;RT-PCR和免疫印迹结果显示,survivin及caspase-3两基因转录和表达水平与杨梅素用药浓度相关,表现为下调survivin的转录和表达,上调caspase-3转录和表达。结论:杨梅素能明显诱导膀胱癌细胞BIU-87发生凋亡,其作用机制可能与下调survivin转录和表达,上调caspase-3转录和表达有关。这为杨梅素应用于临床表浅性膀胱癌的治疗提供了可能的机制和理论基础,并可能为其治疗提供一种新的方法。