【摘 要】
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目的:从mRNA和蛋白水平检测孤儿GPR55(orphan receptor GPR55)在人喉鳞癌组织及癌旁组织的表达情况,并分析GPR55与不同患者临床病理参数之间的关系。通过siRNA干扰GPR55的表
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目的:从mRNA和蛋白水平检测孤儿GPR55(orphan receptor GPR55)在人喉鳞癌组织及癌旁组织的表达情况,并分析GPR55与不同患者临床病理参数之间的关系。通过siRNA干扰GPR55的表达,检测GPR55沉默后对人喉鳞癌Hep-2细胞侵袭和转移能力的影响。方法:1、采用RT-PCR、Western Blot和免疫组化方法检测GPR55在人喉鳞癌组织及癌旁组织的表达情况,并分析GPR55蛋白表达水平与不同患者临床病理参数之间的关系。2、设计并合成特异性siRNA,采用脂质体法瞬时转染人喉鳞癌Hep-2细胞。通过RT-PCR方法检测不同分组中GPR55 m RNA的水平,筛选出沉默效果最佳的片段。采用Transwell侵袭实验和划痕实验检测GPR55沉默后Hep-2细胞的侵袭和转移能力的变化。结果:1、GPR55在人喉鳞癌组织中以中等阳性或强阳性表达为主,而癌旁组织中则以阴性或弱阳性表达为主,并且GPR55的表达与喉鳞癌的分化程度和颈淋巴结转移率有关,差异有统计学意义。GPR55与患者性别、年龄、临床分型、PS评分无关。2、Transwell侵袭实验显示siRNA沉默GPR55后,Hep-2细胞平均穿膜数量比对照组明显减少,P<0.05;划痕实验显示对照组12h和24h的Hep-2细胞迁移率明显较siRNA-GPR55-3转染组高,P<0.01。结论:1、GPR55在喉鳞癌组织中高表达,并且与分化程度和颈淋巴结转移率有关。2、siRNA沉默GPR55后明显抑制Hep-2细胞的侵袭和转移能力。
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