维药药西瓜化学成分及总三萜、总黄酮提取纯化工艺研究

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药西瓜(Citrullus Colocynthis Shrad),又称苦葫芦、苦苹果,是葫芦科植物药西瓜植株干燥成熟的果实,是维吾尔族传统用药之一,在临床上多用作泻药、利尿剂以及治疗风湿性关节炎等症状的药物,后来也用于治疗肝病、血液病、糖尿病以及癌症。药西瓜主要生长于北非沙漠地区,欧洲南部以及中亚一带。药西瓜中含有大量的生物活性成分,如三萜及其皂苷、黄酮及其皂苷以及生物碱和脂肪烷烃、脂肪醇等药用成分。为了进一步深入研究药西瓜的化学成分,更好地将药西瓜这种传统民族药物应用于现代临床医疗领域中,本论文从以下几个方面进行实验研究。1.对药西瓜乙醇提取物的乙酸乙酯部分和正丁醇部分进行系统的化学成分研究(1)将粉碎的药西瓜在乙醇中浸提得到提取物,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到各提取部分部分,乙酸乙酯和正丁醇部分反复运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱以及MCI柱色谱、ODS Rp-18柱色谱、制备薄层色谱板等进行分离纯化,根据理化性质结合现代波谱分析技术对分得的单一化合物进行鉴定,得到13个化合物分别是:对羟基苯甲酸、苯甲酸、邻苯二甲酸甲酯、邻苯二酚、间苯二酚、邻羟基苯甲酸甲酯、4-methylenecyclohexa-2,5-dienone、2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷葫芦素K、16-prop-1-en-yl-2-O-β-D-glucopyranosylcucurbitacin I、天麻素、槲皮素、16-prop-1-en-2-yl-25-O-acetyl-2-O-β-D-glucopyranosylcucurbitacin I,16α,23-epoxy-2,20β-dihydroxycucurbita-1,5,24-diene-3,11-dione 2-O[α-1rhamnopyranosyl-(1→2)-α-Dglucopyranoside]。(2)其中16-prop-1-en-yl-2-O-β-D-glucopyranosylcucurbitacin I、16-prop-1-en-2-yl-25-O-acetyl-2-O-β-D-glucopyranosylcucurbitacin I为首次报道的的新化合物。2.维药药西瓜中总黄酮提取和大孔树脂纯化工艺研究通过单因素实验和正交实验,以温度、料液比、提取时间、溶剂体积分数作为工艺参数,利用回流、微波辅助、超声辅助三种提取方式在不同的提取条件下对药西瓜中的总黄酮进行提取,从而确定在三种提取方式下最佳的工艺参数。(1)回流提取总黄酮的最佳工艺条件为:温度为90oC,提取时间为2 h,乙醇体积分数为95%,料液比1:80。(2)微波辅助提取总黄酮的最佳工艺条件为:提取温度为90oC,乙醇体积分数为95%,提取时间为提取时间为25 min,料液比为1:90。(3)超声辅助提取药西瓜的总黄酮的最佳工艺条件为:提取温度为70oC,乙醇体积分数为90%,提取时间为提取时间为10 min,料液比为1:125。(4)利用大孔树脂富集提取液中黄酮类物质,通过比较8种大孔树脂对药西瓜中黄酮类物质的吸附和解析性能,发现D101树脂最适合药西瓜种总黄酮的提取。结果表明:当控制提取液体积流量以3 m L/min、PH值为6,D101大孔树脂的饱和吸附量最大,为13.638 mg/g。总黄酮最佳洗脱方案为:用去离子水洗脱5 BV除杂,再采用95%甲醇以1 m L/min的流速分段洗脱。3.维药药西瓜中总三萜提取和大孔树脂纯化工艺研究(1)通过正交试验结果可得,回流提取药西瓜的总三萜的最佳工艺条件为:提取温度为90oC,提取时间为3 h,乙醇体积分数为95%,料液比1:90。(2)微波辅助提取药西瓜的总三萜的最佳工艺条件为:提取温度为70oC,提取时间为提取时间为25 min,乙醇体积分数为90%,料液比为1:125。(3)在超声辅助提取试验中提取药西瓜的总三萜的最佳工艺条件为:提取温度为75oC,提取时间为10 min,乙醇体积分数为90%,料液比为1:125。(4)利用大孔树脂富集提取药西瓜提取液中三萜类物质,通过比较8种大孔树脂对药西瓜中三萜类物质的吸附和解析性能,发现D101树脂最适合药西瓜种三萜类物质的提取。结果表明:控制体积流量以3 m L/min、PH值为6,D101大孔树脂的饱和吸附量最大,三萜化合物为9.333 mg/g(以干树脂质量计算)。最佳方案洗脱三萜类化合物为先用去离子水洗脱5 BV除杂,再采用95%甲醇以1 m L/min的流速分段洗脱。
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