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随着生物科学技术的发展,组织工程研究的领域也越来越广,而由于心脑血管疾病的逐年增加,使得临床上需要大量的血管进行移植。虽然大口径血管在临床上的移植相对成功,但是小口径(<6mm)血管的移植效果并不是很理想。近年来,除了在支架方面进行探索外,血管组织工程生物反应器的成功应用也成为研究热点之一。本文成功分离出血管壁细胞,制备了三种血管组织工程支架材料,利用光学显微镜、SEM和切片染色等方法,并检测其生物相容性,在构建小口径血管的研究中,采用了静态培养和动态培养两种方法,以此获得较佳的培养方法。
本论文是在血管组织工程的基础上,构建小口径的组织工程化血管。论文研究的主要内容和结果如下:
利用组织块贴壁法成功分离出血管内皮细胞和平滑肌细胞,经免疫组化染色鉴定,细胞纯度达到95%以上,并且细胞状态和生存活力较强,能大规模培养,适合作为血管组织工程的种子细胞。
选取了小肠黏膜下层基质、脱细胞血管基质和经PEG改性过的PVDF作为组织工程血管的支架材料,对制备方法进行了相应的改进,并利用已成功分离出的种子细胞测定支架材料的细胞相容性等方面的性能。结果表明,细胞在支架上长势良好,且材料的细胞毒性、溶血性能和凝血性能都符合相关的规定,最后得出三种支架的生物相容性都很好,可作为组织工程血管的支架材料。
在构建小口径组织工程血管的过程中,采取了静态培养和动态培养的方法,使用自制的血管组织工程生物反应器进行血管的动态培养,经静态培养一周、培养液循环流量为16.00mL/min运行24h,HE染色发现,细胞在支架材料上生长良好。