湖北贝母微量生物碱的结构研究及浙贝乙素衍生物LD50的测定

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中药贝母系百合科(Liliaceae)贝母属(Fritillaria)多种植物的干燥鳞茎,湖北贝母Fritillaria hupehensis Hsiao et K.C.Hsia原野生于鄂西自治州,现已收载于《中华人民共和国药典》(2000年版,2005版)。本实验以酸提碱沉法从湖北贝母中分离提取了共十七种生物碱,经理化常数鉴定及IR、EI-MS、FAB-MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、1H-1HCOSY、HMQC、HMBC、NOSEY等波谱技术分析,并与标准品对照,鉴定了它们的结构。其中四种为新的微量生物碱,十三种为已知生物碱。这四种生物碱的结构分别是:(20R, 25S) 5α, 14α-cevanine -3β-actyl -6-one (乙酰化浙贝乙素,C1), (20R, 25S) 5α, 14α-cevanine -3β-actyl -6β-ol (乙酰化浙贝甲素, C3 ), 5α,17α-17,23-seco-7,12-dien-jervanine-3β,23β-dihydroxy-6-one ( C8 ), 5α,17α-17,23-seco-7,12-dien-jervanine-3β,13α,23β-trihydroxy-6-one(C9)。并修正了已知生物碱湖贝乙素(hupehenirine) (20S, 25S) 5α, 14α,17β-cevanine-6β-hydroxy-3-one的C5及C17碳的归属。其中乙酰化浙贝乙素、乙酰化浙贝甲素是从湖北贝母中提取的新生物碱;C8和C9是两种新的介藜芦碱类异甾生物碱,它们的结构中具有的两个烯键与六元环酮共轭的骨架,在天然产物中尚属首次发现。浙贝丙素、鄂贝乙素为首次从湖北贝母中分离得到。由于浙贝乙素是湖北贝母中的主要生物碱,且药效学实验表明浙贝乙素具有优良的镇咳、祛痰、平喘之功效的结论,整体效果明显。本课题以浙贝乙素为先导化合物,进行结构改造和结构修饰,合成了乙酰化浙贝乙素,经理化常数测定及FAB-MS、DEPT、1H-NMR等波谱技术分析,鉴定了它的结构。在结构改造的基础上,在药效研究的前提下,我们测定了浙贝乙素及其五种衍生物(乙酰化物、丙酰化物、丁酰化物、氧化物、苯甲酰化物)的LD50值。取昆明种小白鼠,随机分组,腹腔注射给药,以动物急性死亡率为指标,按Bliss法求其量-毒关系的LD50和LD50 95%可信限。结果表明:浙乙乙酰化物、丙酰化物、丁酰化物、苯甲酰化物和氧化物毒性分别为14.39 mg·kg-1、14.47 mg·kg-1、18.41 mg·kg-1、23.21 mg·kg-1、9.98 mg·kg-1 ,均小于浙贝乙素。由此可以得出结论:浙贝乙素的这五种衍生物毒性小,有希望从中得到一高效、低毒的镇咳药物。
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