目的肝细胞癌是一种预后较差的恶性肿瘤,肝细胞癌的药物耐药现象是影响患者预后的重要因素,科研人员探索如何增加治疗肝癌的药物药物敏感性的脚步从未停下。近年,越来越多研究报道MicroRNA参与调控了多种肿瘤药物的效果。本研究主要对MicroRNA-200a参与肝细胞癌的进展和对索拉非尼药效的调控作用及相关机制,寻找可以在体外调控miR200a水平进而增强索拉非尼抗肝癌进展效果的药物,并为其潜在的临床应用价值提供理论依据。方法培养人肝癌细胞系Huh7和Hep-G2,构建miR200a稳转细胞株:miR200a过表达组、对照组、miR200a敲低组。通过qRT-PCR法检测各转染细胞株miR200a表达量,验证转染效和调控miR200a对SIRT1的表达影响以及添加索拉非尼和二甲双胍联合索拉非尼各靶基因的表达情况。MTT的方法检测调控miR200a水平对转染组和转染组细胞添加索拉非尼及二甲双胍联合索拉非尼对转染组细胞活力的影响。WesternBlot检测调控miR200a水平对SIRT1的影响和转染细胞添加索拉非尼及二甲双胍联合索拉对SIRT1及相关蛋白表达情况。Transwell法检测调控miR200a对各转染组细胞的迁移,侵袭能力的影响。克隆观察调控miR200a对各转染组细胞的克隆能力的影响。SPF级BALB/c-nu雄鼠54只,随机分为3大组(转染细胞对照组,转染细胞 索拉非尼组,转染细胞 二甲双胍 索拉非尼联合用药组),每组18只,每大组分为3个小组,每组6只。每小组裸鼠分别皮下种植miR200a过表达组、对照组、miR200a敲低组转染细胞,待成瘤后按每大组裸鼠每日腹腔注射安慰剂(生理盐水)组;索拉非尼组;二甲双胍 索拉非尼联合用药组,连续14天,处死裸鼠,取出瘤体,计算肿瘤体积,qRT-PCR,WesternBlot,免疫组化,免疫荧光等验证瘤体相关基因转录翻译水平的变化。结果上调miR200a不仅可以抑制人肝癌细胞的细胞活力、克隆及迁移侵袭能力;还可以降低SIRT1的表达;上调miR200a水平明显减小裸鼠皮下肿瘤进展;上调miR200a可以增强索拉非尼抗肝癌细胞效果;二甲双胍可以上调miR200a,进一步增强索拉非尼抑制肝癌细胞和裸鼠皮下成瘤进展的作用。结论miR200a可以负性调控人肝癌细胞的增殖、克隆和迁移侵袭能力并强化索拉非尼抗肿瘤效果,二甲双胍可以正性调控肝癌细胞miR200a表达水平,该作用最终可能是通过影响SIRT1表达来发挥作用。