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【目的】观察MUC1 VNTR核酸疫苗诱导BALB/c小鼠的体液及细胞免疫应答,并研究MUC1 VNTR核酸疫苗能否抑制荷载多发性骨髓瘤小鼠肿瘤细胞的生长,保护荷瘤小鼠,以探讨MUC1 VNTR核酸疫苗的特异性抗肿瘤作用及临床应用前景。【方法】质粒pcDNA3.1-MUC1由前期实验中构建,体外以Lipofectamine2000脂质体转染peDNA3.1-MUC1质粒到小鼠多发性骨髓瘤细胞系653中,转染细胞再经G418压力筛选单克隆细胞株653-MUC1。BALB/c正常小鼠,随机分2组:分别为MUC1组(pcDNA3.1-2VNTR免疫组)、Neo组(pcDNA3.1免疫组)。各组小鼠第0周经脾脏注射100μg/μl质粒。脾脏免疫后,第5周以同一质粒经右腿胫前肌再次免疫小鼠。脾脏免疫后第1,2,4,6,8周自小鼠眼眶(内眦静脉)采血,ELISA动态检测血清中抗VNTR特异性抗体的水平。第2次免疫后4周,取脾细胞悬液,LDH法检测CTL反应活性,MTS/PMS法检测脾淋巴细胞增殖活性。再以BALB/c正常小鼠,随机分2组:分别为MUC1组(pcDNA3.1-2VNTR组)、Neo组(pcDNA3.1),各组小鼠同样于第0周经脾脏免疫小鼠,第5周肌肉加强免疫。第2次免疫后7天,各组小鼠经左侧前肢腋下皮下注射1×10~6/100μl/只653-MUC1细胞,每2-3日测量肿瘤长径及短径,观察MUC1 VNTR核酸疫苗抑制荷载多发性骨髓瘤小鼠肿瘤细胞的生长及荷瘤小鼠的生存期。【结果】构建单克隆细胞株653-MUC1经RT-PCR检测可见MUC1 mRNA的表达。pcDNA3.1-2VNTR组小鼠血清中检出了MUC1 VNTR抗原特异性抗体。以pcDNA3.1-2VNTR免疫BALB/c小鼠后,在效靶比为80:1时,可显著地诱导特异性CTL应答。在MUC1 VNTR抗原肽的刺激下,免疫小鼠脾淋巴细胞得到增殖,与Neo组相比,差异有显著意义。pcDNA3.1-2VNTR免疫组小鼠对653-MUC1细胞生长具有明显抑制作用,第24天时,pcDNA3.1-MUC1质粒免疫组小鼠肿瘤体积显著小于Neo组(P＜0.01);且该组小鼠生存期明显长于Neo组(P＜0.01)。【结论】MUC1 VNTR核酸疫苗可诱导小鼠产生特异性细胞及体液免疫应答,并可以抑制荷载多发性骨髓瘤小鼠肿瘤细胞的生长,延长荷瘤小鼠的生存期,为多发性骨髓瘤的疫苗治疗奠定了实验基础。