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背景:胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)具有极高的侵袭性和转移能力,易在诊断时已发生局部浸润和远处转移。上皮间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)是上皮细胞丧失极性转变为具有较高侵袭、迁移能力的间质细胞的生物学过程,是肿瘤早期转移的必经阶段,为肿瘤细胞的侵袭和转移提供了分子基础。然而,EMT介导PDAC转移的分子机制尚未完全阐明。转录因子FOXO3a在多种恶性肿瘤中的表达降低,FOXO3a失活后可诱导肿瘤细胞发生EMT,并促进肿瘤的侵袭和转移,这表明FOXO3a可以作为预测和治疗肿瘤转移的潜在生物标志物。作为酪氨酸激酶受体(RTK)信号传导的调节因子,Sprouty2(SPRY2)被作为是一种抑癌基因,在肿瘤细胞增殖,凋亡,迁移和侵袭中发挥关键作用。一项关于小鼠内皮细胞的研究证实SPRY2作为FOXO的靶基因,介导内皮细胞形态改变和血管稳态形成。因此,我们设想SPRY2可介导PDAC中FOXO3a对下游信号通路的调控并参与FOXO3a诱导的EMT及转移。目的:通过探讨PDAC中SPRY2和FOXO3a介导PDAC发生EMT及转移的分子机制,明确SPRY2可否介导PDAC中FOXO3a对下游信号通路的调控及其是否参与FOXO3a诱导的EMT及转移。方法:1.在130例配对的胰腺导管腺癌组织及癌旁组织中进行免疫组织化学染色。2.通过CCK8检测和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。3.通过划痕实验及transwell迁移和侵袭实验评估细胞迁移和侵袭能力。4.通过q RT-PCR和western blot检测m RNA和蛋白的表达。5.构建BALB/c裸鼠皮下荷瘤模型及肺转移瘤模型以评估胰腺导管腺癌细胞的致瘤能力及远处转移能力结果:1.FOXO3a在PDAC组织中的表达显著降低。FOXO3a的低表达与PDAC患者肿瘤浸润深度、TNM分期、分化程度、淋巴结转移和远处转移及预后不良相关。2.在PDAC细胞系PANC-1和SW1990中,下调FOXO3a或SPRY2可促进细胞增殖并抑制细胞凋亡。3.下调FOXO3a可通过激活β-catenin/TCF4信号通路诱导PANC-1和SW1990细胞发生EMT,促进细胞迁移和侵袭。下调SPRY2也可诱导PANC-1和SW1990细胞发生EMT,促进细胞迁移和侵袭,而这种转变是也通过激活β-catenin/TCF4信号通路实现的。进一步的研究表明沉默β-catenin可逆转PANC-1和SW1990细胞中下调FOXO3a或SPRY2对的EMT相关迁移和侵袭的促进作用,而沉默SPRY2可逆转PANC-1和SW1990细胞中过表达FOXO3a对EMT相关迁移和侵袭的抑制作用。4.FOXO3a可增加SPRY2蛋白的稳定性,而SPRY2可降低β-catenin蛋白的稳定性。5.在裸鼠体内,下调FOXO3a可以促进PANC-1细胞的致瘤能力和肺转移能力。结论:我们的研究表明,下调FOXO3a可通过SPRY2激活β-catenin/TCF4信号通路诱导PDAC发生EMT并促进转移。FOXO3a有潜力成为调控胰腺导管腺癌EMT和治疗的新靶点。