本文从以下几个方面进行论述：　　第一部分 细胞间质蛋白Asporin对胰腺导管腺癌增殖和凋亡的影响　　目的：　　胰腺癌是消化系统恶性程度最高的肿瘤之一，而且由于其在体内位置隐蔽，不易觉察，大多数病人诊断时已经处于中晚期;目前，传统的治疗手段虽然不断改进，但是对胰腺癌的治疗效果并未取得明显的效果。因此深入研究胰腺癌的发生发展机制，寻找新的治疗方法成为目前非常迫切和必要的问题。本文通过研究胰腺癌微环境中细胞间质蛋白Asporin对肿瘤细胞增殖和凋亡生物行为的影响，从而寻找治疗胰腺癌的治疗途径。　　方法：　　1.细胞间质蛋白Asporin在胰腺导管腺癌组织、细胞中的表达情况　　选择胰腺导管腺癌组织、胰腺导管腺癌细胞系（PANC-1、MIA PaCa-2和AsPC-1，BxPC-3）分别进行免疫组化和免疫荧光探讨细胞间质蛋白Asporin在胰腺导管腺癌组织和细胞中定位，再用Westblot方法探讨细胞间质蛋白Asporin在细胞系PANC-2、MIA PaCa-2、AsPC-1和BxPC-3中的表达量。　　2.胰腺星形细胞来源的细胞间质蛋白Asporin与胰腺导管腺癌细胞中表达的细胞间质蛋白Asporin之间的相互作用　　收集活化星形细胞的上清处理胰腺癌细胞，利用Westblot检测胰腺癌细胞中细胞间质蛋白Asporin的表达情况;收集PANC-1和MIA PaCa-2细胞系上清处理胰腺星形细胞，利用Westblot检测星形细胞中细胞间质蛋白Asporin的表达情况。　　3.通过体外实验和体内实验探讨细胞间质蛋白Asporin对胰腺导管腺癌增殖和凋亡的影响。　　通过CCK-8实验和平板克隆实验探讨细胞间质蛋白Asporin对胰腺导管腺癌增殖的影响;通过流式细胞技术、TUNEL实验和Hoechst实验探讨细胞间质蛋白Asporin对胰腺导管腺癌凋亡的影响;通过稳转技术得到细胞间质蛋白敲低的稳转细胞系，然后通过原位种植在体内验证细胞间质蛋白 Asporin对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。　　4.探讨细胞间质蛋白Asporin对胰腺癌细胞对增殖和凋亡的影响的机制　　利用Westblot检测NFκ B/REGγ信号通路相关蛋白在敲低细胞、过表达细胞和对照细胞的表达情况。　　结果：　　1.通过免疫组化发现细胞间质蛋白既可以表达于胰腺导管腺癌的癌细胞中，又可以表达于胰腺导管腺癌的细胞间质中;通过Westblot发现在胰腺导管腺癌细胞系PANC-1和MIA PaCa-2中高表达细胞间质蛋白Asporin，在AsPC-1和BxPC-3中低表达，通过免疫荧光发现无论在胰腺癌细胞中还是星形细胞中，细胞间质蛋白都表达于细胞质中。　　2.星形细胞来源的Asporin能够促进胰腺导管细胞分泌细胞间质蛋白Asporin;而胰腺导管腺癌来源的细胞间质蛋白Asporin能够促进胰腺星形细胞分泌细胞间质蛋白Asporin。　　3.通过CCK8和平板克隆实验证明细胞间质蛋白Asporin促进胰腺导管腺癌的增殖;通过流式细胞实验、TUNEL实验和Hoechst实验证明细胞间质蛋白抑制胰腺导管细胞腺癌凋亡，通过动物实验证明细胞间质蛋白Asporin抑制胰腺导管腺癌细胞凋亡，促进增殖。　　4.细胞间质蛋白Asporin可能通过NF-κ B/REGγ信号通路调节胰腺导管腺癌的增殖和凋亡生物学行为。　　结论：　　细胞间质蛋白Asporin能够促进胰腺导管腺癌的增殖，抑制凋亡等生物行为，因此它有可能成为胰腺导管腺癌治疗的一个分子靶点。　　第二部分 PD-1/PD-L1在胰腺导管腺癌表达状况及对预后的影响　　目的：　　在许多实性肿瘤中，PD-L1(Programmed death ligand1)被确认为一个有效的治疗靶点。在胰腺导管腺癌中，PD-L1对预后的影响已经被大量研究证实。本研究目的是通过应用体外检测方法检测PD-L1在中国人中的表达情况，从而进一步研究PD-1(programmed cell death protein)作为一个治疗靶点的潜在应用价值。　　方法：　　本研究回顾性收集了373例胰腺导管腺癌的癌组织及癌旁组织的石蜡标本。通过组织芯片仪做成芯片，然后通过免疫组化评估PD-L1和PD-1的表达情况，并进一步评估PD-L1和PD-1表达于患者临床特征的关系。　　结果：　　在373例胰腺导管腺癌中，PD-L1阳性共12例，阳性率为3.2％，PD-1阳性共27例，阳性率为7.5％。同时我们还发现PD-L1主要表达与肿瘤细胞的细胞膜上，而在正常组织未观察到阳性病例。通过统计学分析发现，PD-L1表达与淋巴结转移相关。通过单因素分析发现PD-L1阳性表达与无病生存期和总生存期相关，可以作为患者的预后指标，而在多因素分析中，仅无病生存期与患者预后相关。PD-1表达于淋巴细胞，但是通过统计学分析发现，除了病史以外，其他临床特征都与预后不相关。　　结论：　　在胰腺导管腺癌中，PD-L1的阳性率非常低，但是由于PD-L1表达阳性的病例患者无病生存期非常差，因此它却可以作为一个独立的预后指标。