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癌症治疗常因药物缺乏肿瘤细胞特异识别能力,对人体正常组织伤害较大。肿瘤靶向给药体系的研究正是为了提高药物作用的靶向性,增强药效,降低毒副作用。透明质酸(Hyaluronic Acid, HA)是一种天然的糖胺聚糖,具有高度黏弹性、可塑性、非免疫原性、良好的生物相容性及可降解性等优良特性,现已成为药物递送研究的热点。HA既可以作为药物的大分子载体,又可与多种细胞表面受体特异性结合,其中最主要的受体CD44高表达于肿瘤细胞表面。利用该特性,HA可靶向递送抗肿瘤药物至肿瘤组织和细胞内,提高药物对肿瘤细胞作用的有效性,减少用药剂量,降低不良反应。除此之外,HA作为载体能够利用肿瘤组织的高通透性及滞留性,聚集在肿瘤组织中,增强靶向性。苯丁酸(Phenylbutyrate Acid, PBA)是芳香脂肪酸结构化合物,可较为方便地与透明质酸双糖单位上羟基发生酯化反应,适合作为模型药连接至HA。PBA对肿瘤细胞株具有广谱诱导能力,可通过多种调控方式促使肿瘤细胞向正常细胞分化成熟,促进白细胞聚集,改变肿瘤的免疫原性。PBA与载体结合形成载体前药,有利于PBA在靶点周围聚集,在体内逐渐释放,达到缓释及靶向给药作用。本文选用透明质酸作为药物载体,与抗肿瘤药物苯丁酸酯化结合,设计成新型载体前药透明质酸苯丁酸酯(HA-PB),主要研究结果如下。1.本论文首次介绍了新型载体前药透明质酸苯丁酸酯的合成路线,将苯丁酸活化后连接到透明质酸6位羟基上,改变反应条件得到系列酯化产物,最终优化反应条件得到具有良好水溶性的140404、140426、140428批次HA-PB.2.通过红外、核磁、紫外对HA-PB进行结构表征。在红外图谱中,HA-PB在1735 cm-1处出现新的酯键吸收峰,表明反应有酯键生成；核磁结果中,对140404、140426、140428批次HA-PB的核磁化学位移归属,确定由PB引入的苯环区域在低场δ7.29 ppm出现,并分别对图中PB苯环和HA酰胺甲基积分,计算得到三个产物的酯化度分别为13.2%、21.8%和34.4%。3.建立HPLC方法对合成产物HA-PB进行有关物质分析。通过保留时间对照法对有关物质进行定性,并分别作出有关物质的标准曲线,对每个有关物质成分进行定量分析,计算出HA-PB的纯度均>99.0%。然后通过加碱降解法,充分测定HA-PB中PB含量,计算产物酯化度为17.1%、21.8%、30.3%,与核磁法测出结果基本一致,具有较高可信度。4.设置正常组、阴性对照组、阳性对照组、实验组,观察加药培养液作用于小鼠黑色素瘤细胞(B16)后,细胞形态学变化,初步观察发现抑制能力与酯化度大小成正比关系。通过MTT比色法考察HA-PB对小鼠黑色素瘤细胞(B16)的体外抑制活性。结果表明,140404、140426、140428批次HA-PB对B16细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为0.199、0.013、0.017 mmol/L(PB当量),均低于PB的IC50值1.277 mmol/L。初步判断HA-PB的癌细胞抑制作用较原药PB有了增强。