艾纳香的组织培养及挥发油主要化学成分的GC-MS分析

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本文以艾纳香带腋芽茎段为外植体,进行丛生芽诱导、丛生芽增殖、试管苗生根及移栽,组培植株、栽培植株挥发油提取和主要化学成分分析等试验。确定艾纳香快速繁殖的最适条件,为艾纳香种苗的工厂化生产提供技术基础。试验结果如下:1.丛生芽的诱导将带有腋芽的茎段,接种于MS附加不同浓度的BA、NAA培养基上,诱导产生丛生芽的最佳培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L,诱导率可达100%,平均出芽数为15个。2.丛生芽的增殖将诱导出的丛芽,分离并切成带有2-3个小芽的小束丛芽,接种于MS附加不同浓度的BA、NAA培养基上。丛芽增殖继代培养以MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为宜。3.生根培养将高3-4 cm生长健壮的芽苗单个切下,转入1/2 MS附加不同浓度的NAA培养基上,生根较适宜培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg/L。4.移栽组培苗的移栽分4个步骤:沙床准备、炼苗、假植和移栽到大田,移栽成活率80.87%。5.挥发油提?分别取一年生的组培植株和栽培植株下中部叶片、花采用水蒸汽蒸馏法,获得具有特殊香味的黄色挥发油和结晶混合物,分出结晶用于气相色谱-质谱分析。组培植株下部、中部叶片得油率分别为6.68%、4.26%,栽培植株下部、中部叶片得油率分别为11.29%、9.27%,组培植株花的得油率1.19%。试验证明艾纳香的挥发油主要来自于叶片,花的含量很少,栽培植株得油率均高于组培植株。6.挥发油化学成分GC-MS利用GC-MS对挥发油的主要化学成分进行分离鉴定,并运用气相色谱峰面积归一化法确定各主要组分的相对百分含量,结合质谱数据确定化合物的结构。组培植株下部叶片挥发油GC-MS分离出8个化合物,主要成分为:樟脑(68.41%)、龙脑(17.19%);野生栽培植株下部叶片挥发油GC-MS分离出10个化合物,主要成分为:樟脑(6.637%)、龙脑(46.737%);组培植株顶部花挥发油GC-MS分离出8个化合物,主要成分为:樟脑(11.13%)。组织培养技术所生产的艾纳香主要含有樟脑、龙脑等成分,与栽培艾纳香所含成分没有显著差异,但在相对含量上有较大差异。因此组培艾纳香是否能够真正代替栽培艾纳香用于临床还需要进一步的试验进行验证。
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