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目的：本实验通过研究不同浓度的华蟾素、化疗药物顺铂在不同时间时，单药以及联合对人肺腺癌A549细胞生长增殖、诱导凋亡以及细胞周期的影响，并通过免疫组化方法研究三种不同方案对MMP-2活性表达的影响，探讨华蟾素治疗肺腺癌A549细胞可能的作用机制，同时对比单独用药与联合用药的细胞增殖情况，进而为临床上采用中药制剂华蟾素与顺铂联合的方法提供实验理论基础。方法：1．人肺腺癌A549体外培养至对数生长期。2．通过MTT法检测不同浓度华蟾素(0.1、0.2、0.4ug/ml)、顺铂（0.25ug/ml、0.5ug/ml、1.0ug/ml）及两药联合组作用于A549细胞24、48和72小时后的细胞生长抑制率。3.使用流式细胞仪检测华蟾素0.4ug/ml、顺铂0.5ug/ml单独以及联合用于A549细胞48小时之后细胞周期与凋亡率的变化；于倒置光学显微镜下观察细胞凋亡形态特征。4.应用免疫组化法检测不同分组的药物对MMP-2蛋白表达水平的影响。结果:1.华蟾素、顺铂单药组对A549细胞增殖的抑制情况华蟾素、顺铂单药组对A549细胞都有增殖抑制作用，并且其抑制效果随着时间或是浓度的增加而增强，即呈时间—浓度依赖性的表现；2．不同浓度华蟾素与顺铂对人肺腺癌A549细胞形态学的影响华蟾素、顺铂较小剂量作用于A549细胞后，细胞主要以诱导凋亡为主，表现为细胞形态变圆、贴壁较差，较大剂量作用于细胞后，镜下可见细胞内空泡，并且有大量的坏死细胞碎片，多数表现为细胞坏死的形态学改变。3.华蟾素和顺铂联合用药对人肺腺癌A549细胞增殖的作用顺铂0.5ug/ml分别与华蟾素0.1ug/ml、0.2ug/ml、0.4ug/ml联合用药，对人肺腺癌A549细胞的抑制作用均高于单药治疗组，华蟾素浓度的增加，促进增殖的抑制作用，随着时间的延长，特别是在48小时的干预，抑制作用更加明显。4.华蟾素、顺铂以及联合用药对细胞凋亡及细胞周期的影响0.5ug/ml顺铂以及0.4ug/ml华蟾素单独作用于A549细胞48小时后均表现为S期阻滞（p<0.01)；同对照组以及华蟾素、顺铂单药组比较，0.5ug/ml顺铂和0.4ug/ml华蟾素联合用于A549细胞48小时之后，S期细胞比例明显的升高，即表现为S期阻滞（p<0.01)；华蟾素、顺铂两药联合作用于细胞诱导凋亡的作用显著大于单独用药组，和对照组相比较有明显差异（p<0.01)。华蟾素、顺铂联合作用于人肺腺癌A549细胞的细胞凋亡率较单独用药组显著增加（p<0.01)。5.华蟾素、顺铂及两药联合对MMP-2表达的影响华蟾素与顺铂分别单独作用均可抑制MMP-2的活化表达，但两者之间差异不大，没有统计学意义（p<0.0083），联合用药发现其可以明显抑制MMP-2的表达，同单药组相比较，显著增强（p<0.0083)。结论:1.华蟾素、顺铂都可以抑制A549细胞的生长增殖，在一定范围内，具有时间以及浓度依赖性。2.同单药组相比较，华蟾素、顺铂两药联合后，抑制A549细胞生长增殖的作用明显加强。3.华蟾素、顺铂都可以将A549细胞周期阻滞于S期，而联合用药组细胞凋亡率显著高于单药组。4.华蟾素抗癌过程与MMP-2的表达水平有关。华蟾素、顺铂以及二者联合都可以减低MMP-2蛋白的表达，同单药组相比较，二者联合后，作用明显加强。