几种海藻多糖的提取及其抗氧化、抗病毒(TMV)活性研究

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根据前人研究结果,从福建沿海采集及市场购买获得8种海藻(错综根枝藻、管浒苔、紫菜、瓦氏马尾藻、海带、江蓠、羊栖菜、孔石莼),分别采用水提法、酸提法和碱提法提取多糖并计算产率。将其中4种海藻——错综根枝藻、管浒苔、羊栖菜和孔石莼的水提粗多糖去除蛋白、色素和次生代谢物等后获得多糖粗品。其中错综根枝藻多糖粗品(RWP)通过Sepharose 6B和Sephadex G-50后可获得两个组分RWP-1和RWP-2。对错综根枝藻多糖粗品(RWP)和管浒苔多糖粗品(EWP)进行硫酸酯化获得2种硫酸酯化产物。对4种海藻中提取的多糖粗品进行了总糖含量测定、蛋白含量测定、硫酸根含量测定、紫外扫描图谱及红外扫描图谱等研究,证明4种多糖粗品都具有多糖的特征并且蛋白含量很低(羊栖菜多糖(SWP)的蛋白含量最高,为0.16%),含有硫酸根(羊栖菜多糖(SWP)的硫酸根含量最低,为0.76%)。对2种硫酸酯化多糖进行硫酸根含量测定和红外扫描图谱,证明硫酸根含量比酯化前增加(RWPS-2的硫酸根含量增加最少,为1.43%)。 为了测定粗多糖的抗氧化活性,在体外设计了3种自由基试验(超氧负离子自由基(O2-)、羟自由基(OH·)和脂质自由基(R·)),对O2-损伤红细胞膜的保护作用试验和OH·诱导脂质过氧化的保护作用试验,证明了6种多糖样品对清除超氧负离子自由基的活性明显强于其它两种自由基(清除超氧负离子自由基试验中SWP在133μg/mL浓度下的活性最低,为17.86%;清除脂质自由基试验中UWP在400μg/mL浓度下的活性最高,为10.87%),在2个保护作用试验中表现的活性高于清除作用试验(在OH·诱导脂质过氧化的保护作用试验中,EWP在133μg/mL浓度下的活性最低,为17.95%)。 为了测定粗多糖抗病毒活性,在TMV的枯斑寄主心叶烟和系统侵染寄主普通烟上设计了一系列体内和体外试验,试验结果显示6种多糖都有一定的钝化TMV粒子(混合0.5小时后0.1 mg/mL浓度的RWPS-1钝化效率最低,为15.79%)、对侵染位点的保护(0.1 mg/mL浓度的SWP抑制率最低,为28.61%)和抑制TMV粒子复制(体外抑制TMV复制试验中0.1mg/mL浓度的SWP抑制率最低,为10.6%)等活性。6种多糖可以改变苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)等5种防御酶的活性以及引起POD和PPO同工酶的变化,从而诱导烟草产生对TMV的系统抗性。
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