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目的 移植物抗宿主病（graft-versus-host disease，GVHD）是异基因骨髓移植的重要并发症，特别是急性移植物抗宿主病（acute graft-versus-host disease，aGVHD）严重影响移植成功率。目前，多采用免疫抑制剂防治aGVHD，CsA+MTX联合预防方案已为许多骨髓移植中心所采用，但免疫抑制剂毒副作用大，特别是可以引起严重感染、肝、肾中毒、恶性肿瘤等。因此，寻找一种新的、毒副作用小，防治aGVHD效果好的治疗方法是当今医学界急待解决的课题之一。 高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）作为一种理疗方法能够抑制细胞免疫功能，作用比较温和，且毒副作用小，因此越来越多的医学界人士在探讨其对排斥反应方面的作用。本实验研究的目的在于，观察接受异基因骨髓移植后aGVHD小鼠经高压氧、环孢素A及氨甲喋呤不同因素处理后，其皮肤、肺、小肠T淋巴细胞、亚群及其表面粘附分子CD3+、CD4+、CD8+、CD11a+、CD18+表达的变化，探讨高压氧对aGVHD小鼠皮肤、肺和肠组织T细胞、亚群及粘附分子的影响，为临床应用提供实验依据。 方法 一、动物模型复制 供鼠BALB／C，雌性，受鼠BALB／C，C57BL／6，雄性，均为8-12周龄，体重20克左右。处死供鼠，无菌取股骨，取脾，用RPMI1640液调脾细胞及骨髓细胞，浓度分别为2×107／ml及4×ro6/而。将脾细胞与骨髓细胞按体积l:1混合，制成混合细胞悬液（BMC）。受鼠BALB/C，C57BU6在骨髓移植前24h内应用直线加速器进行全身照射，剂量为18O0c伪，剂量率为ZoocGy/min。将BMC经尾静脉输人受鼠体内。 二、实验动物分组与处理 受鼠照射后随机分成4组，A;同基因移植组;B:异基因移植组;C:CsA+M仪组;D:供、受鼠HBO处理组。从移植当日起，A、B组受鼠，每日腹腔注射生理盐水0.Znil。C组受鼠，每日腹腔注射es尼.smg/kg，第r、3、5、9天腹腔注射MTX7mg/mZ。D组供鼠于骨髓移植前3天起，连续3天，每日一次送入直径48cm、深48cm的圆形实验用高压氧舱中，用99.2%氧气冲洗该舱三次后，30分钟内使舱内压力上升至0.25MPa，并维持该压力1 .5小时减压30分钟后取出。D组受鼠于骨髓移植后第一天起至第ro天，送人上述实验用高压氧舱中治疗。条件同上，每日一次。 三、T淋巴细胞亚群及粘附分子的检测 骨髓移植10天后，处死各组小鼠，取皮肤、肺、小肠组织T淋巴细胞、亚群及其表面粘附分子检测。采用免疫组织化学方法取受鼠皮肤、肺、小肠组织，制好切片后，荧光显微镜下观察并照相，应用图象分析仪进行图象处理，计算每视野下荧光面积（xl护um“）。实验结果采用配对t检验进行统计学分析。结果 一、大体观察 术后观察小鼠一般状态，可见A组、D组小鼠一般状态好，毛色光泽。B组小鼠一般状态差，毛色无光泽，有脱毛现象，食欲差。C组小鼠一般状态较好，毛色光泽，较活泼，但食欲差，腹泻。 生存率观察 A组、D组生存率（9/10、9/11），明显高于B组、C组（8/17、9/19），B组与C组相比，生存率无明显变化。A组与D组相比，生存率无明显变化。 三、T淋巴细胞、亚群及粘附分子的表达变化 A组、C组、D组的小鼠皮肤、肺、小肠T淋巴细胞、亚群及粘附分子各项指标均低于B组（P<0.05），C组小鼠各项指标均低于D组（P<0 .05）。结论 aGVHD发病机制极为复杂，迄今尚未完全明了。一般认为，骨髓移植时供、受者间主要和次要组织相容性复合物的差别是引起aGVHD的根本原因。移植物中所含有的成熟T淋巴细胞是导致aGVHD的免疫活性细胞。根据T淋巴细胞表面白细胞分化抗原（CD）的不同，可将其分为CD4+/CD:一和CD4一/CD:十两个亚群，而CD3为小鼠全T细胞标志。静止T细胞受到抗原激活和增殖分化并发挥效应。T细胞表面抗原受体与CD。分子经非共价键结合，形成TCR一抗原一MHC复合体，抗原刺激信号经CD3分子传人细胞内，APC在处理抗原的同时，释放IL一l等细胞因子，CD;+细胞接受活化信号后被激活，并分泌lL一2，而CDS十细胞受到的作用并增殖分化为具有溶细胞作用的细胞毒性T细胞，直接导致靶器官的损伤。因此，机体T淋巴细胞数量及亚群的变化是反映机体免疫状态和移植排斥反应的敏感指标。 近几年来，随着对细胞粘附分子的广泛研究，认为粘附分子是T细胞活化、增殖、及完成各种功能的一个不可缺少的因素。而粘附分子LFA一1（C玖，/CDI:）在T细胞活化及效应期有重要作用。T细胞活化引起aGVHD需要两个信号活动，一是由表达在抗原递呈细胞上，MHC分子的抗原肤片段与TC份CD3复合物结合，而产生的抗原特异性信号，二是协同刺激分子提供的二次信号。大量实验证明，在粘附分子LFA一1/I CAM一1提供的协同刺激下，T细胞活化、增殖、并产生效应。因此，T细胞表面粘附分子的表达，可作为预测aGVHD发生及其严重程度的一个指标。 目前，临床上用来防治aGVHD的药物是免疫抑制剂，CsA与M，Ix联合应用，能够显著抑制T细胞及亚群数量，从而达到拮抗aGvHD的目的，但药物的毒副作用很大，限制了其广