油(木奈)(Prunus salicina var.cordata cv.Younai)离体胚胎培养初步研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:albeewang
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本研究以油(木奈)(Prunus salicina var.cordata cv.Younai)为试材,对幼胚和成熟胚离体培养进行了初步研究。从幼胚培养诱导出了胚性愈伤组织,并建立了继代保持体系;从成熟胚诱导和保持了愈伤组织,并初步探讨了成熟胚的离体萌发。主要结果如下: 1.油(木奈)幼胚愈伤组织的诱导 幼胚用0.1%升汞消毒的最佳消毒时间为8min,外植体的成活率达80.5%;用5mm~7.9mm大小的幼胚在附加2,4-D2.0mg L-1、KT0.5mg L-1、AgNO3 5.0mg L-1+3%山梨醇的WPM培养基上,暗培养能诱导出胚性愈伤组织;在无激素WPM培养基上,幼胚形成少量瘦弱无菌苗。 2.油(木奈)幼胚愈伤组织的保持 幼胚愈伤组织诱导后宜在10d内继代转移;原诱导培养基不适合愈伤组织的长期继代保持:2,4-D浓度在0.3~1.0mg L-1之间有利于愈伤组织的长期继代保持;适当降低蔗糖浓度有利于愈伤组织的增殖;山梨醇不适合作为长期继代愈伤组织的唯一碳源;继代培养周期以15~18d为佳;在培养基中加入植酸能有效防止褐变,而且促进愈伤组织增殖;活性炭和聚乙烯毗咯烷酮也有良好的抑制褐变作用。 采用交替培养法,即2,4-D浓度(0.5mg L-1和1.0mg L-1、碳源(3%山梨醇和1.5%蔗糖)、基本培养基(WPM和MS)、AgNO3隔代添加等交替培养方法,有利于愈伤组织的保持和防止褐变。 3.油(木奈)成熟胚诱导愈伤组织和离体萌发 剥去种皮的成熟胚愈伤组织诱导率高于未剥种皮的成熟胚;在附加2.0 mgL’12,4一D、0.5 mgL一1 KT、1 .0 msL‘10^、3%蔗糖的培养基上能诱导出大量愈伤组织,且愈伤组织的诱导率普遍高于幼胚;采用交替继代方法同样能长期继代保持愈伤组织;成熟胚愈伤组织的分化能力差;在无激素的WPM和MS培养基上,成熟胚能萌发形成一定数量的小苗;剥去种皮的成熟胚萌芽率高于带种皮的成熟胚,光照有利于成熟胚的萌发和发育。
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