【摘 要】
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目的通过体内外实验验证这样的假设,放射治疗产生的活性氧(ROS)通过调节HER3的激活而引起食管癌的放疗抵抗。方法采用CCK-8法检测辐射后细胞的增殖能力,平板克隆检测细胞的放
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目的通过体内外实验验证这样的假设,放射治疗产生的活性氧(ROS)通过调节HER3的激活而引起食管癌的放疗抵抗。方法采用CCK-8法检测辐射后细胞的增殖能力,平板克隆检测细胞的放射敏感性,免疫荧光及流式法检测ROS在辐射前后的含量。通过慢病毒转染的方法,成功构建了稳定的HER3基因敲低的食管鳞癌细胞模型。HER3敲低肿瘤细胞辐射后,与对照组相比其增殖能力、克隆能力、凋亡、周期与DNA损伤,以及裸鼠体内成瘤能力的差异。通过Western Blot的方法检测HER3和p-HER3的蛋白表达水平。结果我们的体外实验结果表明,KYSE-150和ECA-109细胞株在8Gy剂量照射下产生的ROS和p-HER3蛋白表达呈正相关关系。通过克隆形成实验和细胞增殖实验,我们发现敲低HER3显著增强放疗敏感性。我们还发现,照光后,敲低HER3的细胞凋亡至少增强1.51倍(P<0.01),DNA双链断裂至少增加2.14倍(P<0.001)和G2/M期阻滞至少高1.15倍(P<0.05)。同时,我们也通过小鼠肿瘤异种移植实验证实了体内实验的结果。与对照组相比,HER3敲除组的肿瘤对放射治疗明显更加敏感(P<0.001)。结论放射治疗食管鳞状癌细胞时产生的ROS激活了 HER3信号通路,使癌细胞发生放射抵抗,敲低HER3能够增强食管鳞癌的放射敏感性。
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