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目的:回顾性分析真实世界环境下定清片联合化疗治疗急性髓系白血病的临床疗效及其安全性，并观察患者的复发和生存情况。 方法:选择2001年6月～2015年6月期间就诊于上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院血液科，接受并完成2疗程诱导化疗的成人急性髓系白血病（非M3）患者132例进行回顾性分析，研究随访观察至2016年10月1日终止。根据是否联合服用定清片，将这132例患者分为定清片联合化疗组和单纯化疗组，其中定清片联合化疗组64例，单纯化疗组68例。分析比较两组患者治疗前后骨髓象缓解率、LDH（乳酸脱氢酶）、血β2-MG（β2-微球蛋白）、中医证候积分、中医证候疗效、复发率、生存率及不良反应发生率间的差异。 结果: 1.一般资料:两组患者间性别、年龄、年龄分层以及分型构成等基线资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 2.西医疗效:(1)定清片联合化疗组总缓解率(CR+PR)为81.2％，单纯化疗组总缓解率为75.0％，两组间比较，差异无统计学意义(P＞0.05);组内年龄分层比较，年龄＜60岁亚组缓解率高于年龄≥60岁亚组，两亚组间差异有统计学意义(P＜0.05)。(2)定清片联合化疗与单纯化疗组LDH值变化，组内治疗前后比较，差异有统计学意义(P＜0.001);组间治疗前后比较，差异无统计学意义(P＞0.05);组内年龄分层两亚组间治疗前后比较，无统计学差异（P＞0.05）。治疗前和治疗后获CR、PR、NR四组间比较，差异有统计学意义(P＜0.001)。(3)定清片联合化疗组与单纯化疗组β2-MG值变化，组内治疗前后比较，差异有统计学意义(P＜0.001);组间治疗前后比较，差异无统计学意义（P＞0.05）;组内年龄分层两亚组间治疗前后比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗前和治疗后获CR、PR、NR四组间比较，具有显著统计学差异(P＜0.001)。 3.中医证候积分:定清片联合化疗组与单纯化疗组中医证候积分变化，组内治疗前后比较，差异有统计学意义(P＜0.001);组间治疗前后比较，差异有统计学意义(P＜0.05);组内年龄分层两亚组间治疗前后比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 4.中医证候疗效:定清片联合化疗组总有效率为93.8％，优于单纯化疗组86.8％，组间差异有统计学意义（P＜0.05）;组内年龄分层两亚组间中医证候疗效比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 5.复发率:定清片联合化疗组1年复发率为32.4％，2年复发率为44.1％，3年复发率为50.0％，5年复发率为52.9％;单纯化疗组1年复发率为46.5％，2年复发率为53.5％，3年复发率为69.7％，5年复发率为79.1％。组间比较，定清片联合化疗组整体复发率低于单纯化疗组，差异有统计学意义（P＜0.05）;组内年龄分层两亚组间整体复发率比较，年龄≥60岁亚组整体复发率高于年龄＜60岁亚组，差异有统计学意义(P＜0.05)。 6.生存率:定清片联合化疗组1年生存率为75.0％，2年生存率为50.8％，3年生存率为29.8％，5年生存率为21.7％;单纯化疗组1年生存率为76.5％，2年生存率为47.6％，3年生存率为24.1％，5年生存率为11.1％。组间比较，1年、2年、3年和整体生存率差异无统计学意义（P＞0.05），而5年生存率差异具有统计学意义(P＜0.05);组内年龄分层两亚组间整体生存率比较，年龄≥60岁亚组整体生存率低于年龄＜60岁亚组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 7.不良反应:定清片联合化疗组出现消化道反应的有8例，肝损害2例，肾损害0例，心脏毒性1例，不良反应总发生率为17.2％;单纯化疗组出现消化道反应的有12例，肝损害6例，肾损害1例，心脏毒性3例，不良反应总发生率为32.4％。两组间不良反应总发生率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论:定清片联合化疗治疗急性髓系白血病（非M3），在西医疗效上与单纯化疗组相当，但可有效减轻化疗带来的各种不良反应;同时还能降低中医证候积分，减轻患者临床症状，改善生存质量，提高中医疗效，减少疾病复发，并在改善远期生存率有明显优势。另外患者年龄是影响临床疗效和预后的一个重要因素，且血清LDH和β2-MG水平可视为判断疾病发展和预后的参考指标。 实验研究 目的:探讨定清片对急性髓系白血病疗效的作用机理。 方法:收集未缓解AML患者30例进行FLT3、TET2基因突变检测，采用全骨髓液培养法，将定清片全方及其“祛邪”、“扶正”拆方组药物分别作用于伴有FLT3-ITD突变阳性、TET2突变阳性患者及10例正常人骨髓细胞，体外培养48小时，运用实时荧光PCR法检测药物干预前后骨髓中FLT3、TET2 mRNA表达水平的变化。同时将上述三组药物作用于HL-60、THP-1两种不同类型的白血病细胞株，培养48小时，镜下观察细胞形态变化，CCK-8检测细胞活性，流式检测细胞周期和凋亡，实时荧光PCR法检测BCL-2、P53 mRNA表达水平。 结果:1.临床骨髓样本:(1)30例未缓解AML患者中检测出6例FLT3-ITD突变阳性患者，4例TET2突变阳性患者。(2)干预前未缓解组FLT3 mRNA表达水平高于正常对照组（P＜0.001），TET2 mRNA表达水平低于正常对照组（P＜0.001）。在未缓解组内，经定清片全方组、祛邪组和扶正组药物干预后FLT3、TET2 mRNA表达水平较药物干预前及空白组发生不同程度的下调、上调，其中定清片全方组药物对FLT3、TET2 mRNA表达水平下调或上调的作用最强。在正常对照组组内，药物干预前后FLT3、TET2 mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05)。 2.白血病细胞株:(1)对HL-60、THP-1两种白血病细胞进行体外药物干预后，发现各药物干预组细胞数量出现不同程度的减少，体积缩小，胞膜完整并向内凹陷，形成凋亡小体;而空白对照组细胞则生长较旺盛。(2)三组药物均可抑制HL-60、THP-1白血病细胞的活性(P＜0.05)，其中定清片全方组的抑制作用最强，且抑制作用具有一定的时间依赖性。(3)三组药物均可将HL-60、THP-1白血病细胞的细胞周期阻滞于G1期，使处于S期的细胞比例减少(P＜0.05)，从而抑制白血病细胞的增殖和生长，其中定清片全方组作用最强。(4)三组药物均可诱导HL-60、THP-1白血病细胞发生凋亡（P＜0.05），其中定清片全方组诱导细胞凋亡的作用最强。(5)三组药物均对两种白血病细胞中BCL-2 mRNA表达水平均有下调作用，而对P53 mRNA表达水平则具有上调作用(P＜0.05)，其中定清片全方组对BCL-2 mRNA和P53 mRNA表达水平的下调、上调作用最明显，祛邪组次之，扶正组最弱。 结论:FLT3、TET2基因突变与AML发病密切相关，定清片可通过调控FLT3、TET2、BCL-2、P53 mRNA表达水平来抑制白血病细胞的增殖、生长，并加快诱导白血病细胞发生凋亡，推测这可能是定清片治疗AML取得疗效的部分作用机制。