七氟醚吸入麻醉通过促进星形胶质细胞的活化对围术期神经认知紊乱的影响

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目的:研究七氟醚吸入麻醉对老年小鼠围术期神经认知紊乱的影响,探讨星形胶质细胞的活化在七氟醚吸入麻醉诱发老年小鼠围术期神经认知紊乱的作用机制。方法:SPF级雄性C57BL/6小鼠144只,1618个月龄,体质量4045g,采用随机数表分为4组,每组36只,即对照组(C组)、七氟醚组(P组)、手术组(S组)、七氟醚+手术组(PS组)。分别施以假手术、3.5%七氟醚吸入2h、30%O2吸入2h+胫骨骨折切开复位内固定手术和3.5%七氟醚吸入2h+胫骨骨折切开复位内固定手术处理。各组术前1d行Y迷宫实验评估小鼠术前工作记忆的能力,术后1d、3d、7d行Morris水迷宫实验评估各组小鼠空间学习和记忆能力。术后1d、3d、7d行为认知学评估实验后,每组分别随机选择12只小鼠处死,取海马组织,采用免疫荧光染色法测定各组大脑海马区星形胶质细胞形态与GFAP的表达水平;采用DCFH-DA法检测海马区活性氧(ROS)水平;采用化学比色法测定海马区琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性;采用Luminescent法测定海马区ADP、ATP水平,并且计算ADP/ATP。结果:各组小鼠体质量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。小鼠于术前1d的Y迷宫实验中,各组小鼠达到学习标准所需时间、全天错误反应次数与全天总反应时间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。与C组相比,P组于术后第1d、3d的Morris水迷宫实验中,逃避潜伏期延长(P<0.05),目标象限停留时间缩短(P<0.05),穿台次数减少(P<0.05),到达目标象限时间时间延长(P<0.05),S组与C组相比,术后第7d逃避潜伏期延长(P<0.05),目标象限停留时间缩短(P<0.05),穿台次数减少(P<0.05),到达目标象限时间时间延长(P<0.05),与P组、S组相比,PS组于术后1d、3d、7dMorris水迷宫实验中,登台潜伏期显著延长(P<0.01),目标象限停留时间显著缩短(P<0.01),穿台次数明显减少(P<0.01),到达目标象限时间时间明显延长(P<0.01),空间学习记忆能力下降,术后第1d、3d、7d行免疫荧光实验与能量代谢相关实验显示,与C组相比,P组于术后第1d、3d海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞计数增加(P<0.05),活性氧(ROS)释放增多(P<0.05),琥珀酸脱氢酶(SDH)活性降低(P<0.05),二磷酸腺苷/三磷酸腺苷(ADP/ATP)增大(P<0.05),S组与C组相比,术后第7d海马区GFAP阳性细胞计数增加(P<0.05),ROS释放增多(P<0.05),SDH活性降低(P<0.05),ADP/ATP增大(P<0.05),与P、S组相比,PS组术后第1d、3d、7d海马区GFAP阳性细胞计数显著增加(P<0.01),ROS释放明显增多(P<0.01),SDH活性明显降低(P<0.01),ADP/ATP明显增大(P<0.01)。结论:3.5%七氟醚吸入麻醉可致老龄小鼠围术期神经认知紊乱,这可能是七氟醚吸入麻醉可促进小鼠星形胶质细胞的活化,影响小鼠海马中的能量代谢过程所致。
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