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阿托伐他汀钙(Atorvastatin Calcium,ATC)为他汀类调血脂药,是一种新型的3-羟基3-甲基戊二酰辅酶 A(HMG-CoA,3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzymeA)还原酶抑制剂,具有显著的降脂作用,特别在降低胆固醇水平方面,是同类药物的佼佼者;据报道,长期服用 ATC可出现横纹肌溶解等肌毒性反应,本文欲研制ATC新剂型拟改变其体内分布,将肌毒性降至最低水平;另外,因ATC为生物药剂学Ⅱ类药物,水、油溶性均较低,所以关于它的液体制剂鲜有报道。亚麻油是经亚麻籽榨取所得的油,含有丰富Ω-3系列的多不饱和脂肪酸,主要包括α-亚麻酸(十八碳三烯酸)及其代谢产物DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)。FDA批准产品证实,Ω-3系列的多不饱和脂肪酸能显著降低人体甘油三酯水平,具有良好的降血脂功能,此外还能有效的降低血小板凝聚力、减少血栓形成,有预防动脉粥样硬化等作用。 本课题考虑将ATC和亚麻油制成o/w型口服亚微乳剂,首先借助乳剂自身的理化性质改变ATC溶解度低,亚麻油易氧化、口服不便等的缺点;其次凭借粒径较小的亚微乳到达体内后会随着血液循环被截留于网状内皮系统较丰富部位的特点,来改变药物的体内分布,使药物尽量多的分布于靶器官减小在肌肉中的沉积,以降低ATC所引起的肌毒性;最后,联合亚麻油为辅料来制备乳剂以弥补ATC能显著降低胆固醇但对甘油三酯降低效果不理想的不足,使其在降血脂方面起到协同的效果,为提高临床疗效及用药安全性提供参考。 本文首先建立了ATC的体外分析方法并对其理化性质进行了考察,结果显示ATC25℃下在水和亚麻油中的溶解度均较低,分别为75μg·ml-1和80μg·ml-1,脂水分配系数为1.64,且随着pH值的增加逐渐减小;稳定性实验表明其在酸、碱及氧化剂条件下不稳定,提示制剂 pH应值在6.5-7.5之间并加适量抗氧化剂以利于乳剂稳定。 其次以乳剂的外观、粒径、多分散系数(PDI)和Zeta电位等为主要评价指标,通过单因素考察对乳剂进行了处方及制备工艺研究,确定了最优处方及制备工艺:将阿托伐他汀钙(0.1%)加至亚麻油(10%)中,超声使其分散均匀,分别加入油酸(0.1%)和维生素 E(0.1%),超声溶解,60℃保温作为油相;另取泊洛沙姆P188(3%)、甘油(3%)溶解于超纯水中超声至全部溶解,60℃下保温作为水相;两相均保温至60℃时,立即将水相加入至油相中,置于内切式高速匀质分散机中14000rpm匀质5min制备初乳,用氢氧化钠或盐酸溶液(0.5mol·L-1)调节pH至7.0值左右,于高压匀质机中18K循环匀质10次,即得终乳,经验证此处方工艺重复性好,为最优之选。 第三,对乳剂进行了药剂学性质的考察。结果显示,肉眼观察乳剂呈均匀乳白色液体,无分层、漂油现象;通过激光纳米粒度分析仪测得其平均粒径为197.3±5.03nm、Zeta电位为-24.92±0.23mv,pH计测得pH值为7.03±0.06;以超滤离心法所测的载药量和包封率分别为0.49±0.01%和80.7±0.66%;药物分布试验表明,约有69.75%、20.3%和9.3%的药物分别分布于乳剂的油水界面层、水相和油相中。 第四,对乳剂的稳定性及体外释放特点进行了研究。稳定性试验显示,乳剂能在6000rpm下离心15min及稀释100倍条件下稳定存在,无分层、底析等现象;采用透析袋扩散法的体外释放结果表明,ATC混悬液在4h内已基本释放完全,而乳剂在第24 h时还未达到平衡,相较于ATC混悬液本制剂有一定的缓释效果;对模型进行拟合得到方程y=-0.0541x+0.0031及相关系数r=0.9635,结果证明该制剂符合一级释放模型,拟合度良好。 最后,对乳剂的组织分布进行了初步研究。首先建立了 ATC生物样品的HPLC测定方法,经方法学考察,该分析方法的专属性强,ATC在0.1~5μg·ml-1的浓度范围为线性关系良好;其次以25mg/kg的剂量小鼠灌胃给予乳剂后,与自制的 ATC混悬剂相比,药物在小鼠肝和肾等组织的分布存在显著性差异(f2值分别为24.2461和15.7481),由靶向性评价可知本制剂改变了药物的体内分布,趋向分布于肝,而肾、肌肉中却极少存在,证明本研究所制的乳剂能改变药物在肾和肌肉中的分布、具有一定的肝靶向性(Re>1)。