论文部分内容阅读
目的:研究Pokemon在乳腺癌细胞(MCF-7及MDA-MB-231细胞)中对TGF-β1表达的影响及机制,并分析二者在临床组织中表达的相关性。方法:实验分为三部分。第一部分:以体外培养的乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞为研究对象,通过瞬时转染构建高表达Pokemon的MCF-7及MDA-MB-231细胞,通过QPCR分析TGF-β1m RNA水平表达情况,通过免疫荧光法分析TGF-β1蛋白水平表达情况。第二部分:构建TGF-β1启动子,分别检测MCF-7及MDA-MB-231细胞中该启动子活性。通过瞬时转染构建高表达Pokemon的MCF-7及MDA-MB-231细胞,分析Pokemon对该启动子活性的影响,从而分析Pokemon作用于TGF-β1的机制。第三部分:应用免疫组织化学方法检测185例乳腺癌组织中Pokemon及TGF-β1的表达情况,分析二者在临床组织中表达的相关性。结果:1)Pokemon对乳腺癌细胞中TGF-β1的影响。(1)Pokemon能抑制MCF-7细胞中TGF-β1 m RNA及蛋白水平。(2)Pokemon能抑制MDA-MB-231细胞中TGF-β1蛋白水平。2)Pokemon对乳腺癌细胞中TGF-β1的影响机制。(1)Pokemon能抑制MCF-7细胞中TGF-β1启动子活性。(2)Pokemon能抑制MDA-MB-231细胞中TGF-β1启动子活性。3)Pokemon与TGF-β1在临床组织中表达的相关性。185例人乳腺癌组织(包括乳腺癌各种不同的病理类型)进行免疫组化分析显示:Pokemon与TGF-β1表达无明显相关性,差异无统计学意义(p>0.05)。结论:1)Pokemon抑制乳腺癌细胞(MCF-7及MDA-MB-231细胞)中TGF-β1的表达,其机制可能与Pokemon抑制TGF-β1启动子活性有关。2)在乳腺癌组织中,Pokemon与TGF-β1表达无明显相关性。