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植物内生菌是一类种类繁多、在植物体内作用广泛(促进植物生长、抵抗病害等)、易于定殖、发挥作用持久的微生物资源。为筛选到优良抗病促生内生微生物应用于上海生态林,本文分别从樟树、樱花、水杉三个树种的组织内用组织切片和组织匀浆法进行内生菌的分离。在分离到的内生菌中筛选出对植物病原具有拮抗作用及有解磷固氮能力的菌株;同时对菌株的耐盐性进行研究;再对筛选获得的优良菌株进行鉴定;并用绿色荧光蛋白基因标记的方法研究优良菌株在树体内的定殖规律;此外,选用本实验室前人筛选获得的优良菌株在上海生态林上进行菌株的田间抗病促生效应分析试验。主要结果如下:1.从樟树组织内分离到50株细菌、3株真菌。通过平板对抗实验筛选到5株对壳梭孢溃疡病病原菌(Fusicoccum sp.)有拮抗作用、6株对拟盘多毛孢枯枝病病原菌(Pestalotiopsis sp.)有拮抗作用、9株对拟茎点溃疡病病原菌(Phomopsis sp.)有拮抗作用的内生细菌。其中,菌株ZS-37及菌株ZS-3对三种病原菌都有拮抗作用,菌株ZS-1对壳梭孢溃疡病病原菌和拟茎点溃疡病病原菌两种病原菌有较好的拮抗效果,菌株ZS-26及菌株ZS-30对拟盘多毛孢枯枝病病原菌和拟茎点溃疡病病原菌两种病原菌有较好的拮抗效果。从樱花组织内分离到32株细菌。通过平板对抗实验筛选到2株对根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)有拮抗作用的内生细菌,菌株编号为YH-18、YH-20。从水杉组织内分离到22株细菌、3株真菌。通过平板对抗实验筛选到1株对细极链格孢(Alternaria tenuissima)有拮抗作用、2株对异角状拟盘多毛孢(Pestalotiopsis heterocornis)有拮抗作用的内生细菌。其中,菌株SS-15对两种病原菌都有拮抗作用。2.通过分析分离得到的菌株的解磷能力,结果表明在分离到的内生细菌中具有解磷作用的菌株有8株,菌株编号分别为YH-18、YH-20、ZS-1、ZS-37、ZS-28、SS-4、SS-1、SS-15。且菌株培养24h后的发酵液PH均有所下降。筛选到具有固氮作用的菌株有7株。菌株编号为YH-32、ZS-47、SS-15、YH-18、SS-1、ZS-37、ZS-28。内生菌的耐盐性实验结果表明:分离到菌株都能在含5%氯化钠的条件下存活,部分菌株能在含10%氯化钠的条件下存活,所有菌株均不能再含15%氯化钠的条件下存活。筛选到的内生菌均可以较好的适应盐泽土壤,能在上海市盐泽土壤环境下生存,有利于后期的进一步推广。3.选取菌株YH-18、ZS-37、SS-15作为优良菌株进行鉴定,鉴定结果表明这三株菌株分别为Bacillus methylotrophicus、Bacillus anthracis、Bacillus Vanillea。4.采用绿色荧光蛋白标记的方法研究3株候选菌株分别在樟树、樱花、水杉树体内的定殖,成功构建了标记菌株,标记菌株的稳定性均达到了93%左右,成功观测到标记菌株分别定殖在三种树体的根组织。