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恶性肿瘤是危害人类健康的主要疾病之一,发病率逐年上升,化疗是肿瘤治疗的重要手段。肿瘤多药耐药性(multidrug resistance, MDR)的发生是导致化疗失败的主要原因。因此,寻找低毒、高效的多药耐药逆转剂在抗肿瘤药物开发中有重要的意义。本实验选取实验室前期筛选出的具有逆转效果的冬凌草氯仿部位和乙酸乙酯部位、冬凌草甲素、迷迭香酸作为研究材料,以SGC7901/ADR细胞为研究对象,探讨其逆转作用及逆转机制。研究方法：(1)采用MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测人胃癌耐药株SGC7901/ADR细胞对不同化疗药物如阿霉素(Adriamycin, ADR)、长春新碱(Vincristine, VCR)和顺铂(Cisplatin, DDP)的耐药性；用MTT法检测药物对SGC7901/ADR细胞的细胞毒性作用,选择对SGC7901/ADR细胞抑制率小于20%的药物浓度作为该药物的非毒性剂量；MTT法检测药物对SGC7901/ADR细胞的逆转作用；(2)用流式细胞仪检测药物对SGC7901/ADR细胞内罗丹明123(Rhodamine-123,Rh123)蓄积和外排、ADR蓄积的影响,用免疫荧光法检测药物作用细胞(SGC7901/ADR)后P-糖蛋白表达的变化；(3)半定量RT-PCR法检测药物对SGC7901/ADR细胞MDR1基因转录的影响；(4)采用HPLC法测定冬凌草氯仿部位和乙酸乙酯部位中活性成分的指纹图谱。实验结果：(1)SGC7901/ADR细胞不仅对ADR有耐药性,对VCR和DDP也产生耐药性,且耐药倍数分别为11.68、2.89、2.97。通过细胞毒性检测,我们选取对细胞抑制率小于20%的药物浓度为非毒性剂量。冬凌草氯仿部位：10μg/mL、50μg/mL；冬凌草乙酸乙酯部位：12μg/mL、60μtg/mL；冬凌草甲素：2μM、10μM；迷迭香酸：2.4μM、12μM。在逆转实验中,耐药细胞经10μM维拉帕米、10μtg/mL和50μg/mL冬凌草氯仿部位、12μg/mL和60μg/mL冬凌草乙酸乙酯部位、2μM和10μM冬凌草甲素和2.4μM与12μM迷迭香酸处理后得到逆转后的IC50值分别为：3.73、9.25、6.06、8.29、5.63、4.39、3.42、11.02、5.71,逆转倍数为5.32、2.15、3.28、2.39、3.53、4.53、5.81、1.80、3.48,从结果可以看出,药物逆转倍数呈剂量依赖关系；(2)冬凌草氯仿部位、乙酸乙酯部位、冬凌草甲素和迷迭香酸可显著增加SGC7901/ADR细胞内Rh123和ADR的蓄积,减少Rh123的外排。在Rh123蓄积实验中,与阿霉素阴性组相比,Rh123荧光蓄积倍数分别为：1.38、1.42、2.17、1.37；在Rh123外排试验中,荧光蓄积倍数分别为：1.16、2.15、3.01、2.30；在ADR蓄积实验中,ADR荧光蓄积倍数分别为：2.58、2.52、4.25、3.75。(3)冬凌草氯仿部位、乙酸乙酯部位、冬凌草甲素和迷迭香酸可显著抑制SGC7901/ADR细胞内MDR1基因的转录及其蛋白产物P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达。MDR1在转录水平分别下降了59.37%、50.01%、59.60%、58.29%,P-gp分别下降了17.10%、14.17%、18.83%、18.06%。(4)HPLC图谱显示,冬凌草氯仿部位和乙酸乙酯部位图谱峰非常相似,共有11个图谱特征峰,其中含量最高的8号峰是冬凌草甲素,在各部位中相对含量分别为13.84%和15.46%。结论：冬凌草氯仿部位、乙酸乙酯部位、冬凌草甲素和迷迭香酸有较强的逆转人胃癌SGC7901/ADR细胞多药耐药性,耐药机制可能与抑制MDR1基因转录及其蛋白产物P-gp表达有关。