第一部分重度子痫前期患者特异性i PS细胞系的建立目的用仙台病毒将重度子痫前期患者脐血CD3+T细胞重编程为iPSC,建立重度PE患者特异性的i PS细胞系。方法利用Ficoll梯度分离法分离重度PE患者的3ml脐血中单个核细胞,待T细胞在CD3和IL-2的激活作用下扩增5-7天后用携带OCT4、SOX2、KLF4和C-MYC基因的仙台病毒转染。将转染出现的IPSC克隆种植在饲养层MEF培养。对IPSC进行碱性磷酸酶染色,免疫细胞化学检测多潜能分子标志物OCT4,TRA-1-60,NANOG,SOX2,细胞株体外传代及扩增后进行核型分析。结果仙台病毒转染T细胞10-15天出现多个IPSC克隆,转染效率0.02-0.04%。这些IPSC碱性磷酸酶染色阳性,表达多能性标志物,传至40代后核型仍正常。结论重度PE患者少量脐血样本可经仙台病毒高效重编程为IPSC,IPSC具有全能性,扩大了IPSC的来源细胞标本,延伸了IPSC的临床应用,为探索PE为代表的滋养细胞发育异常相关疾病奠定了良好基础。第二部分无饲养层下特异性iPSC定向分化为滋养样细胞目的iPSC转至无饲养层上稳定培养后在小分子(BMP4)的作用下将重度子痫前期患者特异性iPSC定向分化为滋养样细胞。方法选择状态良好的iPSC种植在提前包被Matrigel的六孔板里传代后改用m TeSR1基础培养基培养iPSC,接着利用含10ng/ml人BMP4的无饲养层基础培养基培养5-7天诱导细胞滋养细胞(CTB)分化后继续分化至功能性滋养样细胞。动态观察分化后细胞形态变化,免疫检测滋养细胞标志物顺序表达,检测滋养细胞HCG分泌。结果IPSC在无饲养层条件下多次传代后仍状态良好,分化后的细胞形态为滋养细胞形态,表达CTB标志物CDX2,且第6天时阳性率最高大于80%,继续分化可表达EVT特异性标志物HLA-G、分泌HCG。结论重度子痫前期患者的IPSC可在无饲养层下经BMP4高效分化为CTB,且可继续分化为具有分泌功能的滋养样细胞。