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基因编辑技术己广泛应用于作物遗传改良，并大大提高了育种效率。为了通过CRISPR/Cas9基因编辑技术创制新型温敏核不育系，本研究以6个优异的常规粳稻ZG75、CYG、YG0618、ZG07、T0361、7679和4个优异的常规籼稻2537、6150、6379、1109作为编辑对象，通过敲除TMS5基因，创制粳型和籼型的温敏核不育系。通过对比温敏核不育系的不育起点温度，发现粳型温敏核不育系ZG75S、CYGS、YG0618S、ZG07S、T036IS、7679S的不育起点温度均在28℃～32℃之间，而籼型温敏核不育系2537S、6150S、6379S的不育起点温度在24℃～28℃之间，1109S的不育起点温度低于23.5℃，具有较大的应用价值。说明不同遗传背景材料获得的tmis5突变体的不育起点温度不一样，通过选取不同遗传背景的材料进行TMS5的敲除可能获得不育起点温度较低的温敏核不育系。为了研究1109S的配合力，将其与7个优质父本8025、8028、8034、8038、8048、华占、R534进行测配。通过田间表型鉴定以及农艺性状考察，筛选出了具有较强杂种优势的高产杂交稻组合1109S/8048，1109S/8048组合比区试对照丰两优4号增产13.1%，与父本8048相比，1109S/8048组合增产25.6%。通过米质分析表明，1109S/8048组合的米质与8048的米质无明显差异。温敏核不育系1109S及高产杂交稻组合1109S/8048的获得，为杂交水稻高产育种提供了新的途径。