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研究目的探讨单核巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对人皮肤成纤维细胞MMP-2、MMP-9表达的影响以及其分子生物学机制。研究方法1)ELISA、明胶酶谱及Western Blot检测不同GM-CSF浓度(0、10、50、100、500ng/ml)刺激下MMP-2和MMP-9在成纤维细胞中的表达情况;2)免疫荧光及Western Blot检测GM-CSF及SP600125(JNK抑制剂)对成纤维细胞内JNK/c-Jun磷酸化水平的影响,RT-PCR分别检测GM-CSF或SP600125+GM-CSF对成纤维细胞内MMP-2/-9 m RNA合成的影响,ELISA分别检测GM-CSF或SP600125+GM-CSF处理成纤维细胞后(6、12、24、48h)MMP-2/-9的浓度;3)cck-8试剂盒检测GM-CSF对成纤维细胞增殖的影响,细胞划痕实验检测GM-CSF对成纤维细胞迁移能力的影响。研究结果1)GM-CSF处理后,人皮肤成纤维细胞MMP-2/-9的表达均明显高于对照组(P<0.05),MMP-2/-9的表达量及活性与GM-CSF浓度呈正相关;2)GM-CSF处理后,成纤维细胞内JNK/c-Jun的磷酸化水平明显高于对照组(P<0.05);MMP-2/-9的m RNA转录水平显著高于对照组(P<0.05);SP600125预处理后,与GM-CSF组相比,c-Jun的磷酸化明显被抑制(P<0.05),MMP-2/-9的m RNA水平则显著降低(P<0.05);GM-CSF处理细胞后,上清中MMP-2/-9的浓度在24小时达到最高值,24-48小时逐渐降低,但均显著高于对照组(P<0.05);在SP600125+GM-CSF组,MMP-2的表达低于对照组,而MMP-9的表达明显高于对照组(P<0.05);3)GM-CSF对成纤维细胞的增殖无明显影响(P>0.05);GM-CSF能够促进成纤维细胞的迁移(P<0.05),而SP600125则能抑制成纤维细胞的迁移(P<0.05);结论:GM-CSF通过活化JNK/c-Jun信号通路上调成纤维细胞MMP-2和MMP-9的合成、表达与分泌,并促进成纤维细胞的迁移。