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本研究的目的是提取分离决明子蛋白质和蒽醌苷,观察决明子蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖所致衰老小鼠学习能力、老化相关酶及代谢产物的影响。为进一步寻找决明子的抗衰老有效成分及分析其抗衰老机制奠定基础。
决明子蛋白质的分离采用硫酸铵沉淀法,决明子蒽醌苷的分离采用醋酸铅沉淀法。选用长期皮下注射D-半乳糖形成的衰老小鼠模型,以维生素E为阳性对照,设决明子蛋白大小剂量组、决明子蒽醌苷大小剂量组和决明子蛋白质和蒽醌苷小剂量混合给药组。通过观察小鼠毛色、排便,称量体重、进食量等方法,测定决明子蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖所致衰老小鼠的外观体征的影响;以三等分辐射式迷宫测试和一次性被动回避反应测试的方法,测定决明子蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖所致衰老小鼠的学习能力的影响;通过称量小鼠脑、肝及免疫器官重量,测定决明子蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖所致衰老小鼠免疫等脏器系数的影响;使用试剂盒,测定决明子蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖所致衰老小鼠的老化相关酶和代谢产物的影响。最后对实验结果进行统计分析,以探讨决明子蛋白质和蒽醌苷是否具有抗衰老作用。
与空白对照组比较:模型组小鼠皮下注射(sc)D-半乳糖7周后,毛色暗黄无光、体重显著减轻(p<0.05)、进食量非常显著降低(p<0.01)、呆滞、大便干硬,学习能力显著下降(p<0.05),免疫等脏器系数显著或非常显著的减少(p<0.05,p<0.01),小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力显著降低(p<0.05),脑组织中单胺氧化酶(MAO)活力、丙二醛(MDA)含量以及肝组织中脂褐素(LF)含量显著或非常显著的增加(p<0.05,p<0.01)。这些症状与衰老相符。维生素E能改善模型组小鼠的外观体征,提高其学习能力,增加免疫等脏器系数,增加SOD活力,减少MAO、MDA和LF的含量。表明本试验建造的D-半乳糖衰老模型是成功的。
与模型组比较:①决明子蛋白质和蒽醌苷使小鼠的毛色变得白皙光滑、进食量和体重显著或非常显著的增加(p<0.05,p<0.01)、性情活跃、排便正常;②决明子蛋白质和蒽醌苷能显著提高小鼠正确反应率及延长小鼠步入洞内所需时间(潜伏期)(p<0.05);③决明子蛋白质和蒽醌苷可显著或非常显著地增加小鼠的肝系数、脑系数及胸腺系数(p<0.05,p<0.01),决明子蒽醌苷尚可显著地增加小鼠的脾系数(p<0.05);④决明子蛋白质和蒽醌苷可非常显著提高小鼠脑组织SOD活力(p<0.01)、非常显著降低小鼠脑组织中MDA及肝组织中LF的含量(p<0.01)、决明子蛋白质尚能非常显著降低小鼠脑组织中MAO活力(p<0.01)。可见,决明子蛋白质和蒽醌苷改善了D-半乳糖衰老小鼠的体观外征、提高小鼠的学习能力、预防小鼠脑萎缩、增强小鼠免疫能力、改善老化相关酶及老化代谢产物,因此决明子蛋白质和蒽醌苷具有抗衰老的作用。