苜蓿叶象甲的致病白僵菌筛选及其致病力测定

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新疆苜蓿种植业集约化和规模化的迅速发展,使苜蓿种植结构逐渐单一,虫灾频繁发生,害虫暴发成为苜蓿生产的主要障碍之一。本文通过筛选、诱变的方法获得高致病力的白僵菌菌株,测定其对苜蓿叶象甲及苜蓿籽象甲和苜蓿根瘤象甲成虫的致病力,研究了白僵菌菌株生物学特性以及与化学杀虫剂的相容性,探讨了如何提高白僵菌杀虫效果以及适宜田间应用的条件,为白僵菌的生产应用和苜蓿害虫的生物防治提供理论依据。本论文主要得到以下结果:1.经10个白僵菌菌株对苜蓿叶象甲3龄幼虫的致病力测定,初步筛选出致病力较高Bb01和Bb04两个白僵菌菌株。再将两个菌株稀释成×105、×106、×107、×108、×109个孢子/mL的浓度梯度,对苜蓿叶象甲3龄幼虫进行致病力测定,在处理后15d,Bb01和Bb04的致病力最好,LCso分别为3.19×106个孢子/mL和8.3×106个孢子/mL。2.通过对白僵菌菌株Bb01和Bb04的核糖体DNA-ITS-PCR获得的序列登陆ncbi进行BLAST比对,鉴定Bb01和Bb04均为球孢白僵菌。3.从预先筛选出的白僵菌菌株Bb01出发,采用紫外诱变的方法选出产生儿J‘质酶最高的两个菌株Bb-10-12和Bb-30-14,将这两个菌株与野生型菌株Bb01分别稀释成×105、×106、×107、×108、×109个孢子/mL的浓度梯度,室内测定它们对苜蓿叶象甲3龄幼虫的致病力,结果在处理9d后,Bb-10-12、Bb-30-14菌株及野生型对3龄幼虫的校正死亡率分别为100.00%、77.78%和62.97%,3个菌株之间的致病力存在极显著差异性。从而进一步筛选出更高致病力的白僵菌菌株Bb-10-12。对Bb01和Bb-10-12生物学特性的试验发现,PSA培养基比较适合供试菌株的生长和产孢;温度为25℃时孢子萌发率最高,相对湿度高于75%利于孢子萌发,紫外线对孢子萌发有抑制作用。4.菌株Bb-10-12对苜蓿叶象甲2龄、4龄和成虫的室内致病力测定结果表明,浓度为1.65x108个孢子/mL对2龄、4龄和成虫的LT5o分别为7.73d、9.10d、27.48d。温、湿度对菌株的致病力有影响,在温度为25℃,在相对湿度高于95%条件下白僵菌对苜蓿叶象甲成虫的致病力明显高丁相对湿度低于85%的条件。5.Bb-10-12田间控制苜蓿叶象甲的试验显示,虫生真菌田间防效都在50%以下。在与5种化学杀虫剂的相容性试验中发现,吡虫啉对菌落生长抑制率最低,浓度(1.0×)对Bb01和Bb-10-12的菌落的抑制率分别为6.49%和7.41%;对诱变型菌株Bb-10-12的孢子萌发抑制率最低的为氯虫苯甲酰胺,最高浓度(1.0×)萌发抑制率为16.94%;对野生型菌株Bb01孢子萌发抑制率最小的为氯氟氰菊酯,最高浓度(1.0×)萌发抑制率为22.04%。6.菌株Bb-10-12对苜蓿根瘤象甲和苜蓿籽象甲成虫的致病力测定结果表明,Bb-10-12对苜蓿根瘤象甲具有较高致病力,处理后12d,对苜蓿根瘤象甲的LC50为4.4536×104个孢子/mL:球孢白僵菌对苜蓿籽象甲有一定的致病力,处理后20d,浓度为1.65×109个孢子/mL校正死亡率为74.36%,LC5o为1.7011×108个孢子/mL。
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