【摘 要】
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研究背景肾结石是全球的常见疾病,可以导致慢性肾脏病,甚至肾脏丧失,给许多国家带来了沉重的社会经济和医疗负担。2017年全国关于肾结石的流行病调查显示:肾结石的发生率为6.4%,且10年的复发率为52%。肾结石的发病率在全球范围内都在增加,这些增加在性别、种族和年龄上都可以看到,代谢功能障和饮食习惯的改变可能是一个关键的驱动力,此外,全球变暖可能会影响这些趋势。最近的
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研究背景肾结石是全球的常见疾病,可以导致慢性肾脏病,甚至肾脏丧失,给许多国家带来了沉重的社会经济和医疗负担。2017年全国关于肾结石的流行病调查显示:肾结石的发生率为6.4%,且10年的复发率为52%。肾结石的发病率在全球范围内都在增加,这些增加在性别、种族和年龄上都可以看到,代谢功能障和饮食习惯的改变可能是一个关键的驱动力,此外,全球变暖可能会影响这些趋势。最近的流行病学研究表明,肾结石与心血管疾病、高血压、肥胖、糖尿病、代谢综合征有关,这些都是公认的慢性肾脏病(ChronicKidneyDisease,CKD)危险因素。因此,深入研究肾结石的发生、发展机制,加强预防和治疗迫在眉睫。大量的研究已经证实80-90%的结石成分为草酸钙(calciumoxalate,CaOx)。无论是动物实验还是临床实验均显示,肾小管上皮细胞暴露于高草酸或CaOx结晶中,晶体中会产生过量的活性氧(ReactiveOxygenSpecies,ROS),导致损伤和炎症。在结石患者和实验诱导的CaOx肾结石大鼠的尿液中都可以检测到氧化应激和炎症的主要标志。抗氧化处理可以减少草酸钙结晶肾动物模型的肾脏损伤。由此可见,氧化应激和炎症反应在整个CaOx结石形成、进展过程中起着重要作用。氢作为自然界最简单和最丰富的元素,曾经被认为对高等生物没有任何生物学效应,自日本科学家发现氢气可通过选择性抗氧化治疗疾病后,氢气在各个领域得到广泛的关注和研究,且发现氢气在多种疾病模型和人类疾病中显示出预防和治疗效果。近年来,固态氢载体的生物学效应,成为氢医学的热点。纳米氢化镁(MagnesiumHydride,MgH_2)是一种新型高效的镁基储氢材料,具有高储氢、质量轻等优点,能够水解缓慢释放氢气,持续时间长。2016年首次有学者将氢化镁用于生物学研究,研究结果提示氢化镁能够改善喂食高脂饮食的野生型小鼠的血浆甘油三酯水平,并延长了它们的平均寿命,可能的机制是氢化镁在体内产生氢气,氢气刺激过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)基因表达促进脂肪酸代谢。因为氢化镁较氢气具有携带方便,使用方便,且体内缓慢释放氢气,具有一定的量效关系,所以推测氢化镁对结晶肾损伤模型应有一定的改善作用。但是氢化镁对结晶肾损伤的保护机制仍不明确,需要进一步研究。Perilipin2(PLIN2)是一种脂肪相关分化蛋白,主要定位于细胞内脂滴表面,促进胞内脂滴形成,保护甘油三酯免受脂解。PLIN2作为特异性性标记物可以推测动脉粥样硬化的脂质积聚情况,而且还可以影响多种代谢相关性疾病如胰岛素抵抗、糖尿病、脂肪肝及肥胖症等都。本研究旨在探讨氢化镁是否具有改善结晶肾模型肾损伤的程度及是否能够通过PLIN2发挥其改善作用。研究目的一、氢化镁改善草酸盐诱导的结晶肾损伤的作用研究二、氢化镁缓解结晶肾损伤的潜在靶点筛选三、氢化镁调控PLIN2缓解结晶肾损伤的机制研究研究方法一、动物模型的建立及分组动物实验一:购买36只雄性野生型C57B/L6小鼠(8周龄),随机分为6组,分别是盐水组(Con,n=6)、乙醛酸盐组(Gly,n=6)、乙醛酸盐 氢化镁50mg/Kg组(Gly MH50,n=6)、乙醛酸盐 氢化镁100mg/Kg组(Gly MH100,n=6)、乙醛酸盐 氢化镁200mg/Kg组(Gly MH200,n=6)、乙醛酸盐 氢化镁400mg/Kg组(Gly MH400,n=6)。动物实验二:另40只雄性C57BL/6小鼠(8周龄),随机分为5个实验组:盐水组(Con,n=8);乙醛酸诱导的草酸钙结晶组(Gly,n=8);乙醛酸 氢化镁组(GH,n=8);乙醛酸 氢氧化镁组(GOH,n=8);乙醛酸 玉米油组(GV,n=8)。动物实验一:提前2天分别使用50、100、200、400mg/kg剂量的MgH_2灌胃治疗。第3天给予乙醛酸盐腹腔注射造模,1天一次,连续注射5天,第8天处死小鼠。动物实验二:提前2天分别予氢化镁(200mg/kg)、氢氧化镁(450mg/kg)、玉米油0.1ml灌胃,第3天给予乙醛酸盐腹腔注射造模,1天一次,连续注射5天,第8天处死小鼠。二、肾组织病理染色肾组织取材固定后,进行常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、烘片,按照实验步骤,进行H
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