论文部分内容阅读
研究背景:多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄女性最常见的一种内分泌疾病,发病率约为5-15%。该综合征的异质性较强,患者的临床表现包括高雄激素、肥胖、不孕及糖脂代谢异常。其发病机制至今未明,目前认为是遗传与环境因素共同作用的结果。既往研究发现PCOS的子代新生儿入院率增加,远期出现类PCOS样表型的风险增加;家系研究也发现PCOS患者的父母及兄弟姐妹容易出现代谢紊乱的表型,提示遗传因素在PCOS发病机制中的作用。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点作为人类遗传变异类型中最常见的一种近年来受到广泛的关注。既往全基因组关联研究(Genome-Wide Association Studies,GWAS)确定了 18 个 SNP位点基因频率与PCOS患病之间的关联性。但这些位点在PCOS子代中的传递及其与子代表型的关联性尚未得到验证。研究这些风险基因在表型遗传中的贡献有助于进一步阐明PCOS的病因机制。研究目的:研究PCOS相关SNP在子代中的传递情况及其与子代表型变化的相关性。研究方法:选择172名符合鹿特丹诊断标准的PCOS患者的子代,并按照子代的年龄匹配选择了 529名非PCOS女性所生的子代作为对照。所有入组子代都是辅助生殖技术受孕,年龄为1到8岁。于清晨空腹采集所有子代的外周血(2岁以下为脐血)提取DNA,使用Sanger测序,TaqMan探针和Sequenom MassARRAY等方法对样品进行测序。并对子代进行生长发育指标的测量(身高、体重、BMI)及内分泌代谢各项指标(LH、E2、T、DHEAS、AMH、FT3、FT4、FBG、FINS、CHOL、LDL-C、HDL-C 等)的检测。比较PCOS子代与对照组子代的基因和基因型频率以及临床表型。研究结果:PCOS男性子代相比于对照组男性子代,空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)的水平更高(P=0.032),胰岛素抵抗稳态模型(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)(P=0.032)以及胰岛β细胞功能稳态模型(homeostasis model assessment ofpancreatic beta cell function,HOMA-β)也更高(P=0.034)。在女性子代中,PCOS子代相比对照组子代抗缪勒氏管激素(anti-mullerian hormone,AMH)水平显著升高(P=0.001)。新生儿结局和生长发育指标都没有发现显著性差异。基因和基因型频率的分析结果发现,在男性子代中存在差异的位点包括:位于DENND1A基因上的rs10818854 位点(P等位基因=0.021,P基因型=0.024),位于FSHR基因上的 rs2268361 位点(P等位基因=0.013)和rs2349415位点(P等位基因=0.047,P基因型=0.014),以及位于INSR基因上的rs2059807位点(P等位基因=0.028)。在女性子代中存在差异的位点为位于DENND1A基因上的rs2479106位点(P等位基因=0.046,P基因型=0.036)。通过基因型-表型关联性分析,发现在PCOS男性子代中,携带rs10818854-A基因的子代FINS水平升高(P=0.037),HOMA-β代偿性增强(P=0.008),校正父母年龄、子代年龄以及母亲BMI之后结果仍有统计学意义(P校正别为0.046及0.01)。携带rs2349415-T基因的PCOS男性子代也表现为FINS水平升高(P=0.023),HOMA-β代偿性增强(P=0.013),以及出现HOMA-IR升高(P=0.03),其中HOMA-β结果校正后仍有统计学意义(P校正=0.03)。携带rs2268361-C基因的PCOS男性子代也出现了同样的结果,FINS、HOMA-IR及HOMA-β水平显著性升高(P值分别为0.029,0.03,0.046),在校正母亲年龄、子代年龄与父母BMI后所有结果仍有统计学意义(P校正分别为0.002,0.003,0.005)。但是在女性子代中,没有发现rs2479106位点风险基因与AMH水平的关联性。结论:PCOS患者的子代与对照组子代相比出现类PCOS表型的风险更高,男性子代出现胰岛素水平异常而女性子代出现AMH水平异常。并且男性子代代谢表型的异常与PCOS风险基因之间存在相关性。