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安祖花(Anthurium andreanum Lind.)作为世界第二大热带花卉,因其独特的观赏魅力倍受人们的青睐,但仅有的品种已不能满足人们的需求。因此,许多研究者通过基因改造手段,对其进行花色改变,以提高商品价值。本研究的主要目标是通过农杆菌介导的遗传转化方法导入类胡萝卜素合成酶基因LycB,使得叶片中积累大量的类胡萝卜素,从而改变了安祖花的花色。本研究的主要研究结果如下:(1)优化了安祖花的组织培养体系。首先,对比了液体培养和固体培养这两种培养方式对安祖花愈伤组织诱导率的影响。结果表明,液体培养要明显优于固体培养,并且液体培养基诱导的愈伤组织诱导率大约是固体培养的3～4倍。其次,通过正交实验,分析NAA、活性碳、水解乳蛋白、香蕉泥四个因素对安祖花生根壮苗的影响,并得到最佳培养方案。当培养基中含NAA 0.05mg/L、香蕉泥100g/L时,T×P生根良好,而ARZ在NAA0. 05mg/L、水解乳蛋白400 g/L的培养基中生根最佳。(2)建立了根癌农杆菌介导的安祖花遗传转化体系。以愈伤组织为转化受体,详细地探讨了农杆菌浓度、浸染时间、共培养时间、AS浓度、超声波处理对T-DNA转化的影响,并优化了转化条件。结果表明,农杆菌浓度、浸染时间、共培养时间、AS浓度、超声波处理都对农杆菌介导的遗传转化有一定的影响,它们在一定范围内与抗性愈伤率呈正比,这些因素过高和过低都不利于农杆菌的转化;将愈伤组织在OD600=0.6的菌液中浸染15min,然后超声波处理20s,再在黑暗条件下于含100μmol/LAS的共培养基中培养3d可获得最佳的T-DNA转化效率。利用此优化的转化系统进行农杆菌的浸染,并在含卡那霉素180mg/L和头孢霉素300mg/L的筛选培养基上进行筛选,得到抗性愈伤组织,增殖到一定大小,分化成苗,再进行生根壮苗培养,最后对这些抗性苗进行PCR及PCR-Southern检测,确定得到七株转基因植株。