研究背景和目的自体脂肪组织因为其来源广泛、获取方便等优点被认为是最理想的软组织填充材料。因此自体脂肪移植术已成为了当前整形外科领域应对大体积软组织缺损及组织填充的主要治疗手段之一。然而,移植后脂肪的存活率尚偏低,现有的理论仍然无法完整的阐明游离脂肪移植后在机体内的保留机制,其中关于细胞外基质（ECM）的作用更是甚少被提及。目前认为,ECM能够在机体内对细胞起到物理支持的作用,并且能够通过传递信号分子参与调控细胞活动,但是对自体脂肪移植后移植物内ECM的变化并无深入研究。许多研究中都观察到在脂肪移植物中有大量巨噬细胞浸润,然而对脂肪移植物ECM重塑的具体作用并没有进行探究。本实验将在裸鼠游离脂肪移植模型当中探索ECM的变化情况,观察移植物中ECM的重塑机制,以及对移植物保留的影响。方法1.脂肪移植中细胞外基质的保存模式及早期浸润的宿主巨噬细胞对其降解产生的影响共使用30只裸鼠,并建立脂肪移植模型,在移植前对人脂肪组织移植物中的ECM进行特异性的NHS染料标记。移植后在不同时间点对裸鼠进行处死取材,观察移植物在不同时间点体积的保留情况以及ECM和脂肪细胞所发生的变化、移植物中浸润的宿主炎性细胞在其中发挥的作用及ECM降解对脂肪移植物保留的影响机制。2.脂肪移植中浸润的巨噬细胞对后期细胞外基质ECM重塑的影响共使用30只裸鼠,并建立脂肪移植模型,通过免疫组化、免疫荧光染色以及qRT-PCR等技术对不同时间点移植物中ECM的新生、转归等情况进行评估,并探讨由宿主浸润的巨噬细胞所募集而来的成纤维细胞与ECM重塑的关系。同时,本研究探讨了 ECM新生对脂肪移植物保留的影响机制。结果1.游离脂肪移植后,移植物体积随着取材时间的推移呈现明显减小的趋势,且移植物中的固有ECM和脂肪细胞都出现了明显的减少。2.在游离脂肪移植后的早期可观察到大量的有核细胞浸润,此时移植物中高表达MCP-1和MIP-1α等巨噬细胞趋化因子,通过免疫荧光证实这些浸润的有核细胞为MAC2阳性的巨噬细胞,这些巨噬细胞在浸润的过程中分泌了大量的基质金属蛋白酶MMP1,而MMP1阳性的区域中出现了大量ECM断裂、折叠甚至缺失的现象。3.游离脂肪移植后可观察到随着时间点的推移逐渐出现胶原沉积的现象,在移植后的第7天可观察到趋化M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化的因子IL-4和IL-10高表达。在移植后的第7天成纤维细胞的募集因子TGF-β和bFGF达到顶峰。这些募集而来的成纤维细胞分泌了大量的前体胶原,参与了移植物中的ECM新生。结论细胞外基质（ECM）作为脂肪组织中主要的结构性成分,在游离脂肪移植后的重塑直接影响着脂肪移植后移植物的保留情况。游离脂肪移植后的早期,浸润的宿主巨噬细胞通过分泌基质金属蛋白酶MMP1对移植物中固有的ECM进行降解。晚期移植物内浸润的巨噬细胞会募集宿主的成纤维细胞,参与ECM的新生。脂肪移植后ECM的重塑过程影响着移植物的保留,巨噬细胞在此过程中发挥着重要的作用。