恶性肿瘤对人类健康的威胁十分巨大。肿瘤中有一类与皮肤紧密相关的肿瘤，即皮肤癌是人类常患的肿瘤之一，黑色素瘤又是皮肤癌中一种恶性程度极高的恶性肿瘤，其平均发病年龄在45岁左右，在50岁以后随年龄增长发病率也随之增高。恶性黑色素瘤(malignant melanoma，MM)是皮肤癌中最致命的癌症之一，其发展是通过恶性黑色素细胞转化而来的。它通常是由暴露于太阳光中的紫外线引起的DNA损伤所致，或者是遗传引起的，在皮肤癌的死亡率达80％。在早期，其治疗可以通过手术切除，而当前的癌症治疗方法中，晚期恶性黑色素瘤是很难治疗的。　　到目前为止，在黑色素瘤的众多治疗方案（手术、化疗、放疗、热疗、免疫疗法和电疗等）中，手术切除仍是治疗黑色素瘤的主要方法。但是，黑色素瘤经过手术切除后，其预后性很差，并且有很大的可能会复发。近年来，随着抗肿瘤药物的不断推陈出新，也有治疗黑色素瘤的一些化学药物，其中抗黑色素瘤药物达卡巴嗪和抗肿瘤药物顺铂等化疗对黑色素瘤的治疗有一定的效果，但效果也比较差，这种化疗的有效率在25％以下。因此，寻找更加有效的治疗黑色素瘤的新药物成为广大学者关注的焦点，也具有十分重要的临床意义。　　盐霉素是一种分子量为751Da大小的、从白色链霉菌的培养物中发现的聚醚系抗生物质一元羧酸聚醚类抗生素，其分子式为C42H70O11。它对细胞中K+、Na+等阳离子具有较高的亲和力，能增强阳离子通过脂膜屏障的能力，改变细胞内外的离子浓度而影响渗透压，使细胞崩解。盐霉素对革兰阳性菌表现出高抗菌活性，包括细菌如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSE)和耐甲氧西林葡萄球菌(MRSE)和结核分枝杆菌。盐霉素对真菌不具有活性，如念珠菌和革兰阴性细菌。此外，研究表明盐霉素可以诱导人多种肿瘤细胞的凋亡，但不引起正常细胞（如正常人的T细胞）凋亡。通过增强蛋白水解活性，盐霉素可以诱导Bcl-2高表达、P-糖蛋白耐药细胞的凋亡，不依赖抑癌蛋白P53等。另外一项研究表明，盐霉素可以杀死小鼠的乳腺癌干细胞，其效果比抗癌药物紫杉醇更有效，是它药效的100多倍。此外，还发现盐霉素在许多不同类型的人类癌细胞中展出其高抗癌活性。因此，盐霉素作为化疗药物治疗癌症，其对于肿瘤可能具有特殊的作用。　　本文考察了盐霉素对黑色素瘤A375细胞相关生物学行为的影响。首先，研究了盐霉素对A375细胞增殖的影响，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。其次，研究了盐霉素对A375迁移和侵袭行为的影响。第三，利用免疫荧光染色法研究了盐霉素对黑色素瘤A375细胞骨架F-actin的影响。主要研究内容和结果如下:　　(1)黑色素瘤A375细胞培养　　人类黑色素瘤A375细胞系，由重庆大学唐丽灵教授馈赠。A375细胞培养于DMEM高糖培养液中，包含10％胎牛血清、100U/mL青霉素、100U/mL的链霉素、37℃大气湿度、5％二氧化碳，使用0.25％胰蛋白酶和0.02mol/L EDTA进行A375细胞的消化、传代。　　(2)盐霉素抑制黑色素瘤A375细胞增殖　　用不同浓度的盐霉素（5，10和15nM）作用黑色素瘤A375细胞24h，48h和72h，采用CCK-8实验评估了盐霉素对A375细胞增殖的影响。结果表明，盐霉素对细胞的增殖有明显抑制作用，并且呈现时间和剂量依赖性。高浓度的盐霉素(15nM)处理A375细胞24h，48h和72h后，能够明显抑制A375细胞生长。　　(3)盐霉素对黑色素瘤细胞A375周期的影响　　进一步利用流式细胞术检测了盐霉素对黑色素瘤细胞A375细胞周期的影响。将1×105个/mL细胞黑色素瘤细胞A375细胞种植于6孔板中，5％二氧化碳中，37℃孵育24h。细胞经0.5％胎牛血清饥饿12h后，用5，10nM盐霉素处理24h，同时设立阴性对照组。结果表明，和对照组相比，经5，10nM盐霉素处理24h后，细胞周期没有显著性的变化。　　(4)盐霉素对黑色素瘤细胞凋亡的影响　　抗肿瘤药物通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥其抗肿瘤活性，为了证明盐霉素对黑色素瘤细胞A375的凋亡作用，利用5，10nM盐霉素作用黑色素瘤细胞A375处理24h，利用流式细胞仪对细胞凋亡进行检测。结果表明，5,10nM盐霉素作用黑色素瘤细胞A375后，各组之间细胞凋亡没有出现显著性的差异。　　(5)盐霉素抑制黑色素瘤细胞的迁移　　进一步采用Transwell法探讨了盐霉素对黑素瘤A375细胞迁移的影响。将1×105个/mL细胞接种于Transwell上室的无血清培养基，下室为含血清培养基。用浓度分别为5和10nM盐霉素处理A375细胞，孵育24h。结果发现，与对照组比较，盐霉素明显抑制黑色素瘤细胞的迁移能力。　　此外，还采用划痕愈合法考察了盐霉素对黑色素瘤细胞迁移的影响。结果同样发现，盐霉素也有效抑制黑素瘤A375细胞的迁移。　　(6)盐霉素对黑色素瘤细胞骨架F-actin的影响　　细胞骨架与细胞迁移能力密切相关。进一步采用免疫荧光染色观察了盐霉素作用下黑色素瘤细胞骨架F-actin的变化。首先，将2×104个/mL细胞接种于玻片上37℃大气湿度、5％二氧化碳中培养24h，然后细胞用0.5％的胎牛血清饥饿处理12h后用浓度5和10nM盐霉素处理A375细胞24h。免疫荧光染色表明，与对照组相比，盐霉素能够降低黑色素瘤细胞的细胞骨架F-actin的表达。　　综上，本文初步研究了盐霉素对黑色素瘤细胞增殖和迁移行为的影响，证实了盐霉素可明显抑制黑素瘤细胞的增殖和迁移能力，提示盐霉素可能是一种潜在的抗黑色素瘤的有效药物。