番木瓜中生物碱的分离与结构鉴定

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番木瓜含有丰富的生物活性成分,生物碱物质就是其中之一。目前,针对番木瓜中生物碱物质的研究报道还比较少,本论文的主要研究内容为番木瓜叶和果中生物碱成分的分离与结构鉴定。具体内容如下:(1)采用生物碱沉淀法、薄层层析法(TLC)、LC-MS法对番木瓜叶和果中的生物碱成分进行初步研究,检测到番木瓜叶中含有番木瓜碱、伪番木瓜碱、去氢番木瓜碱Ⅰ、去氢番木瓜碱Ⅱ4种生物碱,番木瓜果中含有番木瓜碱,以及另2种未知的生物碱。(2)采用硅胶柱层析法结合化学沉淀法,从番木瓜叶生物碱提取物中分离得到3个沉淀物(Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ),经紫外(UV)、红外(IR)、质谱(MS)、核磁共振(NMR)等仪器分析手段鉴定结构,鉴定沉淀物Ⅰ和Ⅱ同为番木瓜碱,推测沉淀物Ⅲ为去氢番木瓜碱Ⅰ。(3)首次建立了番木瓜碱的定量检测方法,方法:Waters X BridgeTMC18色谱柱,流动相为乙腈和乙酸铵(0.05mol/L pH8.5),洗脱条件为0~5min25%乙腈,5~15min25~40%乙腈,15~30min40%乙腈,30~35min40%~100%乙腈,35~40min100%乙腈,40~45min100%~25%乙腈,45~55min25%乙腈,流速为0.8mL/min,检测器为PAD,波长304nm,柱温为室温。(4)应用统计学方法对检测方法进行了科学验证,重复性RSD为0.062%,日间精密度RSD为0.065%,日内精密度RSD为0.061%,峰面积RSD为1.0%,平均回收率为98.86%,证实方法重复性好、精确度高、稳定性好。用此方法测得所得到的番木瓜碱纯度为95.35%,番木瓜叶中含量为0.930mg/g(干基),番木瓜果中含量为0.036mg/g(干基),番木瓜籽中未检测到。(5)设计了一条番木瓜叶生物碱粗产品的制备路线,应用其制得粗产品,产品的得率为0.4188%,番木瓜碱含量达17.57%,番木瓜碱的提取率为79.12%。
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