LncRNA PVT1在胃癌中的表达与临床意义研究

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目的:检测长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)在胃癌(Gastric cancer,GC)和正常人血液与组织中的表达水平,分析PVT1对胃癌的诊断价值,同时探讨PVT1与c-myc对胃癌发生发展的影响。方法:(1)收集胃癌患者血样87例、正常血样94例,采用实时定量PCR(q RT-PCR)检测PVT1在胃癌患者血液中的m RNA表达水平。(2)收集胃癌石蜡标本50例,正常胃粘膜蜡块40例。采用原位杂交和免疫组织化学分别检测PVT1与c-myc蛋白在胃癌中的表达,χ2检验比较其在胃癌和正常组织中的表达水平及与患者临床特点的联系,spearman分析两者之间的相关性。(3)通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制PVT1的表达,CCK8、Transwell侵袭和迁移实验检测PVT1对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。(4)Western Blot检测PVT1与c-myc两者之间的联系。结果:(1)胃癌患者血液中PVT1表达量高于正常组(P<0.05),且与淋巴结转移和临床分期相关(P<0.05)。(2)原位杂交和免疫组化结果显示,PVT1、c-myc蛋白胞浆胞核均有表达,且均在胃癌组织中高表达(P<0.05)。PVT1表达与淋巴结转移和临床分期相关(P<0.05);c-myc蛋白与胃癌患者临床分期相关(P<0.05);spearman相关性分析结果显示PVT1与c-myc呈正相关。(3)干扰PVT1的表达后,BGC823和AGS胃癌细胞的侵袭和迁移能力减弱,细胞增殖能力未见其改变。(4)Western Blot结果显示,在胃癌细胞中干扰PVT1表达其c-myc蛋白表达下降。结论:PVT1在胃癌患者血液和组织中均高表达,与患者淋巴结转移和临床分期相关。在胃癌细胞中抑制PVT1表达,其侵袭和迁移能力均减弱,PVT1表达与c-myc表达呈正相关,PVT1可能通过影响c-myc的表达,参与胃癌的发生和发展。
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